山羊Neuromedin S及其受体基因的克隆和mRNA在组织器官的表达

【摘要】：【目的】神经介素S(Neuromedin S)是近年发现的一种神经肽,由36个氨基酸组成,为孤儿G-蛋白藕联受体FM-3/GPR66和FM-4/TGR-1的内源性配体,与Neuromedin U(NMU)结合相同的受体(NMUR-1和NMUR-2),其C末端与NMU分享7个氨基酸核心结构。NMS及其受体mRNA在中枢神经系统和外周组织均有广泛分布。NMS通过其受体发挥生理作用,具有调节机体生物节律、抑制摄食和饮水、影响行为和神经内分泌等多种生理学功能。文献中未见对山羊NMS及其受体的基因克隆和mRNA在组织器官表达的研究,本文旨在克隆山羊NMS及其受体基因片段,研究NMS/NMUR在山羊体内的表达情况。【方法】利用同源克隆方法克隆山羊NMS及其受体基因片段,用RT-PCR方法研究NMS及其受体mRNA在山羊体内的表达。【结果】首次克隆了山羊NMS及其受体NMUR-1和NMUR-2的部分核苷酸序列,并将其登录在GenBank数据库中,登录号分别为GQ150540、GQ351271和FJ842857。利用生物信息学分析软件对山羊NMS及其受体的核苷酸序列和氨基酸序列进行了分析。克隆的山羊NMS由34个氨基酸组成,山羊NMS基因核苷酸序列与猪、牛、人、大猩猩、猕猴、马等哺乳动物的核苷酸同源性分别达97.6%、95.1%、84.1%、84.3%、83.0%、81.6%,而与大鼠、小鼠的同源性较低,分别为72.4%、75.7%,预测的氨基酸同源性和核苷酸同源性基本相符。山羊NMUR-1和NMUR-2的核苷酸和氨基酸序列与其它物种均具有较高的同源性,跨膜分析显示这两个受体氨基酸具有典型的跨膜结构。NMS和NMUR-2 mRNA在山羊体内广泛表达,在脊髓、脑干、下丘脑、大脑皮质、小脑、垂体、海马、嗅球、气管、食管、主动脉、甲状腺、胸腺、心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、乳腺、胃、肠、卵巢、子宫、睾丸、附睾、胰、下颌腺和胆囊中均有表达,但NMUR-1 mRNA仅在胃肠道和心、肺、脾、肾、肾上腺、胰中表达。【结论】山羊NMS及其受体基因在进化过程中高度保守。