慢病毒载体介导表达西尼罗河病毒prME蛋白

【摘要】：西尼罗河热是近年来肆虐北美地区的一种虫媒性传染病。尽管,目前我国尚未发现该病的传入,但具备该病流行和传播的条件,因此,开展其疫苗、诊断方法等前期研究,对于加强我国在该领域的技术储备,应对将来可能发生的疫情具有重要的战略意义。本研究将西尼罗河病毒(WNV)的主要免疫原性基因prME插入到HIV-1慢病毒载体中,构建转移质粒pHR-WNV-prME。然后,在脂质体介导下,将该质粒与pCMV△8.2、p-VSV/G共转染293T细胞,48小时后收获细胞上清。将上清转导正常293T细胞后,通过荧光观察、间接免疫荧光和western blot检测,结果表明:利用HIV-1慢病毒载体系统包装得到了假病毒,可以高效转导293T细胞,并实现了WNV prME基因在被转导细胞中的表达,从而为基于慢病毒载体的WNV新型疫苗研究奠定了基础。