收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

抗J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系建立

叶建强  秦爱建  邵红霞  刘红梅  金文杰  刘岳龙  
【摘要】:将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-J env)插入pcDNA3.1真核表达载体,构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞。细胞经传30代后,冻存。13个月后复苏,置不含药物的培养基中传代培养。连续传40代后,分别用PCR、Southern blot、间接免疫荧光(IFA)及Western blot对该细胞中的env基因进行了检测,并进行了抗病毒感染分析。研究结果表明,通过Zeocin药物筛选获得了稳定表达ALV-J env基因的鸡胚成纤维细胞系,命名为pcDNA-env-DF-1细胞。该细胞在体外抗ALV-J感染试验中,能抵抗1×104个TCID_(50)病毒感染量,提示所构建的细胞系具有良好的抗病毒作用。这一细胞系的构建为研究ALV-J Env蛋白与宿主细胞表面受体相互作用分子机理提供了很好的工具。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 凌育焱;禽白血病病毒研究新进展[J];畜牧兽医科技信息;1998年17期
2 刘红梅;叶建强;秦爱建;祁克宗;;脂质体介导马立克病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞[J];动物医学进展;2006年02期
3 范书才;李虹;肖睿;;禽白血病病毒分离鉴定[J];中国兽药杂志;2006年09期
4 杨琴;张兴晓;杨灵芝;;3种细胞培养流感病毒的比较[J];动物医学进展;2009年11期
5 陈志胜;王丙云;黄文静;陈胜锋;计慧琴;;不同饲养层对鸡胚胎干细胞培养效果的影响[J];生物技术通讯;2010年03期
6 张志胜;李艳琴;李占雷;席庆艳;康亚男;韩新影;;羊软骨II型胶原蛋白对鸡胚成纤维细胞生长的影响[J];河北农业大学学报;2007年03期
7 贾庆利;康春长;马爱团;钟秀会;杨润德;史万玉;;鸡传染性法氏囊病毒增殖和纯化方法的研究[J];今日畜牧兽医;2008年06期
8 王红;陈瑞爱;彭小亮;唐满华;;鸡传染性法氏囊中等毒力(B87株)种毒繁殖工艺改进的试验报告——采用鸡胚成纤维细胞繁殖种毒的试验方法[J];广东畜牧兽医科技;2007年01期
9 孙莹;邹亚学;潘风光;郑梅竹;柏洪武;孙刚;崔文王景;张玉静;;鸡胚成纤维细胞和马立克氏淋巴瘤细胞端粒酶基因的表达水平[J];中国兽医学报;2007年05期
10 戴建明;何先红;赵文明;吴信生;李碧春;;鸡胚胎干细胞的分离和培养[J];中国畜牧杂志;2007年19期
11 姜秋杰;王广美;丁壮;丛彦龙;樊娇;宋德武;李鑫;;鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定[J];吉林畜牧兽医;2010年12期
12 薛春宜,毕英佐,曹永长,朱基美;用ELISA检测传染性囊病病毒诱导的细胞凋亡[J];华南农业大学学报;1999年04期
13 范书才;李虹;肖睿;;禽白血病-肉瘤病毒的RT-PCR检测[J];中国兽药杂志;2006年06期
14 马莉;朱金凤;汤承;李明义;李定霏;岳华;;siRNA干涉禽流感病毒PA基因在鸡胚成纤维细胞中的表达[J];河南农业大学学报;2007年04期
15 潘风光;郑梅竹;周玉;卢士英;罗翔丹;艾永兴;;马立克病病毒中meq基因对CEF细胞chTERT mRNA转录水平的影响[J];中国生物制品学杂志;2007年10期
16 刘爱玲;刘长军;张艳萍;闫福海;张锋;;鸡马立克病毒流行强毒株的致弱研究[J];中国预防兽医学报;2010年01期
17 邱玉玉;李晓霞;吴从平;孙淑红;刘锦华;张显忠;;J-亚群禽白血病病毒中国广东野毒株的分离与鉴定[J];家畜生态学报;2007年05期
18 DrkongSonchiu,周剑峰;禽白血病病毒J亚群[J];山东家禽;1999年05期
19 孙淼;李金彩;郭振华;曹红;常建宇;陈福勇;;J亚型禽白血病病毒的分离与鉴定[J];中国兽医杂志;2009年10期
20 石文慧;韩新影;康亚男;卢军霞;吕蔚;杨润德;刘艳琴;;禽B型白血病病毒的分离及分子分型鉴定[J];动物医学进展;2010年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 叶建强;秦爱建;邵红霞;刘红梅;金文杰;刘岳龙;;抗J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系建立[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
2 顾小雪;韩雪;蔡林;张硕;李晓霞;汪葆玥;遇秀玲;翟新验;;血管瘤型J亚型禽白血病病毒的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
3 杨玉莹;叶建强;赵振华;秦爱建;顾玉芳;;禽白血病病毒J亚群内蒙株的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
4 秦爱建;崔治中;LEE LUCY;FADLY ALY;;抗J亚群禽白血病病毒囊膜糖蛋白特异性单克隆抗体的研制及其特性[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
5 孙淼;吴艳;郭振华;曾凡桂;曹红;郑世军;陈福勇;;J亚型禽白血病病毒分子流行病学调查及进化分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
6 张志;崔治中;赵宏坤;;我国2000~2001年J亚群禽白血病病毒分离株gp85基因的序列比较[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
7 张志;赵宏坤;崔治中;;J亚群禽白血病病毒gp37基因的克隆和序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
8 杨玉莹;秦爱建;赵振华;叶建强;顾玉芳;王金铃;;J亚群禽白血病病毒膜表面糖蛋白基因gp85的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
9 秦爱建;LEE LUCY;;禽白血病病毒J亚群重组囊膜蛋白基因的表达效果[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
10 秦爱建;崔冶中;Lucy Lee;Aly Fadly;;禽白血病病毒J亚群囊膜蛋白env基因的克隆和表达[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
3 张在平;荧光定量PCR检测禽白血病病毒与RNA干扰抑制J亚群禽白血病病毒复制的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
4 吴晓平;商品蛋鸡源J亚群禽白血病病毒分离株生物学特性研究[D];扬州大学;2010年
5 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
6 杨玉莹;J亚群禽白血病病毒内蒙株的分离鉴定及其部分分子生物学特性的研究[D];内蒙古农业大学;2003年
7 成子强;禽白血病病毒J亚群(ALV-J)内蒙株的建立及致瘤机理的研究[D];内蒙古农业大学;2002年
8 林雪彦;鸡消化道乳酸杆菌的黏附研究[D];山东农业大学;2006年
9 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
10 邱亚峰;表达MDV gB CTL表位与鸡HSP108融合蛋白基因的重组CVI988病毒的构建及免疫保护试验[D];南京农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱美真;山东某地方品系鸡鸡胚中禽白血病病毒的分离及序列分析[D];山东农业大学;2010年
2 石文慧;禽B型白血病病毒生物学特性的分析及研究[D];河北农业大学;2010年
3 朱钰峰;地方品系蛋鸡群中禽白血病病毒的鉴定和J亚群禽白血病病毒受体蛋白的分离[D];扬州大学;2011年
4 邱波;血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2010年
5 石敏;血管瘤型J亚群禽白血病病毒全基因组核酸序列分析及gp85基因的原核表达[D];四川农业大学;2011年
6 刘功振;禽白血病病毒J亚群、B亚群的分离鉴定及核酸探针的制备[D];山东农业大学;2010年
7 康忠惠;A、B亚群禽白血病病毒LAMP检测方法的建立及初步应用[D];东北农业大学;2011年
8 刘丽娜;J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及初步应用[D];华中农业大学;2012年
9 王丽;A和B亚群禽白血病病毒gp85基因的表达及其抗血清的亚群特异性比较[D];山东农业大学;2012年
10 张爱玲;广西禽白血病病毒流行株的分子鉴定和分型研究[D];广西大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 樊万朝 吴国华;国内首批转基因鸡在扬州诞生[N];中国高新技术产业导报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978