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重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测

马凤龙  崔雪志  傅兴伦  刘焕奇  
【摘要】:重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tα1插入到pET32a后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-PAGE检测,胸腺素α1获得可溶性表达。检测到与目的蛋白相对分子量(21.8KDa)相符的条带。重组Tα1在大肠杆菌中获得可溶性表达.诱导表达菌高压破碎后进行亲和层析纯化,收集的洗脱蛋白峰经脱盐处理后,15%SDS-PAGE检测纯化效果.通过BALB/c小鼠脾淋巴细胞转化实验测定纯化胸腺素α1融合蛋白的活性,与人用胸腺素α1的活性比较结果显示,基因工程表达的胸腺素α1明显具有促进淋巴细胞增殖的活性.

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