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鸡A-FABP抗血清制备及其组织表达特性分析

石慧  王启贵  张庆秋  李辉  
【摘要】:本文旨在制备鸡脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的多克隆抗血清,并分析A-FABP的组织表达特性。RT-PCR扩增A-FABP基因,构建鸡A-FABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/A-FABP。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导产生GST/A-FABP融合蛋白,用亲和层析纯化目的蛋白,将纯化的GST/A-FABP融合蛋白免疫家兔制备抗血清,并利用此抗血清分析鸡A-FABP基因的组织表达特性。本研究诱导得到了一个40kDa(14kDa-FABP+26kDa GST)的融合蛋白,获得了效价较高、特异性强的鸡A-FABP的抗血清。鸡A-FABP的组织表达特性研究结果表明,该基因在脂肪组织中有较高表达,但在心脏、肝脏、肌肉、肌胃、脾、小肠、肺和肾中没有检测到信号。

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