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兔ghrelin组织分布及其基因克隆的研究

贾翠平  雷治海  苏娟  张文龙  武枫林  施玉萍  
【摘要】:Glirelin是Kojlima等人于1999年在人和小鼠的胃组织中发现的一种多肽,为生长激素促分泌素(Growth hormone secretagogue)受体(GHs-R)天然的内源性配体,能够促进生长激素(GH)释放,故命名为ghrelin。Ghrelin通过其受体发挥作用,具有促进GH分泌,调节能量平衡,刺激胃酸分泌,调节心血管活动,增强免疫应答,抗细胞增值,影响糖代谢,引起焦虑和改善记忆力,调节睡眠,维持睾丸正常功能等多种生物学作用。本试验采用免疫组织化学技术和RT-PCR方法开展了这方面的研究。免疫组化结果显示,在外周组织ghrelin免疫阳性细胞主要分布于胃肠道,在胃内,ghrelin免疫阳性细胞主要位于胃底腺区胃腺的颈部和底部,在贲门腺区和幽门腺区分布较少;在肠道,免疫阳性细胞分布于十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠的粘膜层,在肠腺和肠绒毛上皮分布较多。在中枢神经系统,ghrelin免疫阳性细胞在下丘脑、大脑皮质、迷走神经背侧运动核和脊髓腹侧角内均有分布;在下丘脑主要分布于弓状核、腹内侧核、室旁核、背内侧核和外侧区。从兔胃中提取总RNA,根据Genbank上已发表的猪ghrelin mRNA序列设计合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了目的片段,经克隆、转化鉴定正确后进行序列测定,得到326 bp目的片段,经验证分析该序列为兔ghrelin基因的部分片段,并登录在Genbank上,基因登录号为EF566009。随后对兔体内glirelin基因的表达进行了研究,结果显示,ghrelin mRNA在兔大脑、下丘脑、垂体、脑干、脊髓、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、心、肝、脾、肺、肾、睾丸、卵巢和下颌腺等组织器官中均有表达,该结果与在其它动物上获得的结果基本相似,表明ghrelin在进化上是保守的。

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