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尼罗罗非鱼肥大细胞中类胰蛋白酶免疫组化的研究

林树根  王寿昆  林旋  李志纲  黄玉章  
【摘要】:本试验采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1,应用免疫组织化学Elivision二步法对尼罗罗非鱼(T.niloticus)组织中类胰蛋白酶阳性肥大细胞存在的可能性进行了探索性研究。为证实该技术的可靠性,同时使用人胃癌组织作为阳性对照,并与肥大细胞的甲苯胺兰和阿利新兰-沙黄0染色法进行了比较。市售健康尼罗罗非鱼400-500g4尾。剖开腹腔,取食管、胃贲门、胃体、胃幽门,小肠(前肠、中肠、后肠)于10%中性缓冲福马林(10%NBF)、Bouin's和Carnoy分别固定,常规脱水、透明,石蜡包埋,um切片。鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1,Elivision二步法试剂盒,DAB显示剂,人胃癌组织阳性对照片,均购自福州迈新生物技术有限公司。免疫组化染色步骤按试剂盒说明书操作。NBF和Bouin's固定的尼罗罗非鱼食管、胃、肠组织中,类胰蛋白酶阳性细胞胞浆染成棕黄色,数量很少,分布于食管黏膜固有层、胃腺体之间和黏膜固有层、小肠上皮基部和固有层。细胞形态圆形或椭圆形。而甲苯胺兰法和阿利新兰-沙黄0染色,肥大细胞的分布明显多于类胰蛋白酶阳性细胞,且在肌层和外膜的结缔组织中均有分布。两种固定液固定的人胃癌组织镜检时,在肿瘤间质中均能观察到许多胞浆为棕黄色的细胞,即类胰蛋白酶阳性细胞。阴性对照片胞浆无着色。

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