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猪附红细胞体荧光定量PCR检测方法的建立

朱绍辉  吴延功  单虎  王志亮  孙承英  赵永刚  
【摘要】:参照猪附红细胞体16S rRNA的基因序列,设计引物,建立SYBR GreenⅠ荧光PCR方法检测猪附红细胞体病原,确定特异性产物的Tm值,同时做普通PCR。试验结果表明:特异性产物的Tm值为88.5℃,最低能检测到0.036fg/μL阳性质粒标准品。并以阳性质粒标准品10倍倍比稀释的模板进行荧光PCR,通过对反应体系和反应条件进行筛选和优化,最终建立了检测猪附红细胞体的标准曲线。建立的SYBR GreenⅠ荧光PCR检测方法,显示了较好的特异性、敏感性、广谱性,为以后用于临床检测和调查猪附红细胞体病在我国的流行情况提供了新的技术手段。

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