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斑点叉尾鮰生长激素基因的克隆、进化分析

颜其贵  冯迎春  林涛  冯婷  于辉  李华  
【摘要】:以提取的斑点叉尾鮰脑垂体总 RNA 为模板,用 Oligo(dT)作为引物逆转录(RT)出 cDNA 后以生长激素的特异引物进行 PCR 扩增,成功扩增出其生长激素基因。将此基因克隆于 pMD18-T vector 并经质粒 PCR 和 Xho Ⅰ/EcoR Ⅰ双酶切鉴定后命名为 pMD18-GH。测序结果显示 pMD18-GH 中含有完整的斑点叉尾鮰生长激素基因开放阅读框,其大小为603bp,编码200个氨基酸残基。推导的生长激素前体由21个氨基酸的信号肽和179个氨基酸的成熟肽组成。同源性分析表明斑点叉尾鮰与哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类的生长激素基因同源性差异较大,与鱼类较近。以生长激素基因的 ORF 序列构建的系统进化树表明斑点叉尾鮰与鲇形目的亲缘关系最近。

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