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鸭肝炎病毒间接免疫荧光检测与定位方法的建立

陈海军  程安春  汪铭书  陈孝跃  
【摘要】:本文以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)免疫兔制备兔抗 DHV-Ⅰ抗体, 通过对各种反应物的工作浓度与作用时间的优化,建立了 DHV 的间接免疫荧光检测技术.结果表明建立的 IFA 与 DHV-Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝脏等出现阳性反应,与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝脏以及健康雏鸭的肝脏出现阴性反应。感染 DHV-Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、胸腺、法氏囊、胰腺、肠道 IFA 检测呈阳性或强阳性,DHV-Ⅰ抗原主要分布于感染细胞的细胞质。对65个临床病料进行了检测,检测结果与鸡胚分离法进行比对,结果符合率为96.1%。该法具有良好特异性,可用于 DHV-Ⅰ在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV-Ⅰ感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断.

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