收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于16sRNA的双重荧光定量PCR检测双歧杆菌和芽孢杆菌方法的建立及初步应用

尹念春  程安春  汪铭书  曹省艳  邓树轩  曹平  张振华  颜彬  朱德康  罗启慧  陈孝跃  
【摘要】:目的建立一种能同时检测双歧杆菌和芽孢杆菌的双重荧光定量 PCR 方法。方法通过对双歧杆菌和芽孢杆菌的引物、探针的浓度、Mg2~+浓度、Taq 酶的用量、反应条件等进行优化,并作了特异性、敏感性和重复性实验,建立了可同时检测临床标本中双歧杆菌和芽孢杆菌的双重荧光定量 PCR 方法。结果该方法在两菌 DNA 含量为10~8~10~4 copies 有较好的线性关系;检测两菌标准品 DNA 模板最少检测到的细菌数分别为9 CFU/mL 和6 CFU/mL;特异性试验表明该检测方法只对双歧杆菌和芽孢杆菌基因组呈阳性反应。分别用该技术和单重荧光定量 PCR 检测25份来自雏鸭的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠,结果显示两种方法对样品的检测符合率100%。结论本研究建立的双重荧光定量 PCR 方法可同时定量检测临床标本中双歧杆菌和芽孢杆菌,该法比单重荧光定量 PCR 更方便、快速准确。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 ;转让或合作生产双歧杆菌活性饮料[J];内江科技;1998年01期
2 赖新峰,王立生,潘令嘉,周殿元;双歧杆菌对裸鼠腹腔巨噬细胞激活作用的初步观察[J];中国微生态学杂志;1999年06期
3 ;双歧杆菌与低聚木糖[J];食品与发酵科技;2009年03期
4 崔涌泉;;双歧杆菌,让你的肠道年轻起来[J];大家健康;2010年09期
5 蒋寒青;卢行安;康白;;对双歧杆菌DM9227株的实验研究 Ⅱ.双歧杆菌DM9227株对小鼠的毒性试验研究[J];中国微生态学杂志;1993年02期
6 徐菊芬,张梅芳,王士长;促双歧杆菌生长因子的比较试验[J];广西农业生物科学;1996年04期
7 鲍行豪,沈为民,沈永芳;微生态制品中双歧杆菌活存因素的探讨[J];中国微生态学杂志;1997年06期
8 刘兰,曹郁生,黄筱萍;双歧杆菌选择计数方法的研究进展[J];食品与发酵工业;1999年04期
9 张振玲,池根億;双歧杆菌对RAW264.7细胞的免疫刺激作用[J];微生物学通报;2000年04期
10 ;一种具有良好治疗和保健功能的活菌制剂——双歧杆菌保健制品[J];内江科技;1996年05期
11 高巍,刘晨黎;双歧杆菌在胃肠道微生物区系中的作用及其粘膜附着机制[J];石河子大学学报(自然科学版);2002年04期
12 纪芳,黄敏,伦永志,袁杰利,康白;灭活的双歧杆菌对小鼠血清中细胞因子水平的影响[J];中国微生态学杂志;2003年02期
13 李寿森;宋如森;;双歧酸奶与健康长寿[J];科学大众(中学版);1997年12期
14 ;万星BF纯双歧杆菌保健品[J];黑龙江科技信息;1997年11期
15 张振玲,池根億;双歧杆菌菌种特性的研究[J];山东科学;1999年03期
16 夏宏钢,何楚莹,陈卫,张灏;双歧杆菌生长因子的研究[J];乳业科学与技术;2003年03期
17 陈雪梅;邱翔;;双歧杆菌的研究进展[J];畜禽业;2007年02期
18 郑跃杰,潘令嘉,叶桂安,周殿元;由蛋白质介导的双歧杆菌对体外培养肠上皮细胞的粘附[J];中国微生态学杂志;1997年01期
19 黄耀坚,郑忠辉,宋思扬,田耕,苏文金,郑毅汶;双歧杆菌质粒的检测及其对抗生素敏感性[J];中国微生态学杂志;1997年03期
20 郑跃杰,潘令嘉,叶桂安,周殿元;双歧杆菌粘附素受体的初步观察[J];中国微生态学杂志;1997年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 尹念春;程安春;汪铭书;曹省艳;邓树轩;曹平;张振华;颜彬;朱德康;罗启慧;陈孝跃;;基于16sRNA的双重荧光定量PCR检测双歧杆菌和芽孢杆菌方法的建立及初步应用[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(上册)[C];2008年
2 高传庆;潘康成;张钧利;;国外饲用芽孢杆菌的研究和应用[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(上册)[C];2010年
3 潘康成;高传庆;张钧利;范可珏;冯兴;张亚兰;;三株益生芽孢杆菌的16S rDNA测序鉴定[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(上册)[C];2010年
4 潘康成;倪学勤;方静;;BL38芽孢杆菌制剂对鸡免疫促进作用的研究[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第六次学术研讨会论文集[C];2002年
5 刘桂君;尚宏忠;;生防菌芽孢杆菌的分离鉴定与拮抗性实验[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
6 程茜;聂晶;;双歧杆菌及其WPG对脐血来源DC分化成熟的影响[A];第六届全国儿科微生态学学术会议暨儿科微生态学新进展学习班资料汇编[C];2008年
7 熊菲;程茜;;双歧杆菌对单核细胞来源的树突状细胞的影响[A];中国营养学会第九次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2004年
8 黄鸿眉;程茜;;双歧杆菌对轮状病毒感染肠上皮细胞IL-8、TNF-α分泌的影响[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年
9 刘丽达;倪学勤;曾东;;双歧杆菌植酸酶的研究进展[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(上册)[C];2008年
10 管晓冉;张德纯;李金玲;席青;;双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠免疫功能的影响[A];重庆市预防医学会2010年论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 丁延芹;固氮芽孢杆菌的分离、鉴定及其glnB基因的初步研究[D];中国农业大学;2004年
2 李青青;耐氧性双歧杆菌的筛选及其生理特性与应用研究[D];浙江大学;2010年
3 邹强;双歧杆菌微胶囊的研究[D];江南大学;2012年
4 许飞利;我国食品工业常用益生乳酸菌菌种分型与溯源数据库的研究[D];江南大学;2011年
5 高卫华;芽孢杆菌胞外蛋白酶合成及抑菌功能的调控机制研究[D];南开大学;2010年
6 姚君;携带hIL-10基因的双歧杆菌治疗小鼠溃疡性结肠炎的研究[D];暨南大学;2011年
7 孟祥晨;双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究[D];东北农业大学;2002年
8 焦凌霞;DnaK基因调控酸土脂环酸芽孢杆菌嗜酸耐热生理特性研究[D];西北农林科技大学;2012年
9 林玲;内生芽孢杆菌及抗菌物质的鉴定和对作物黄萎病的防治效果[D];南京农业大学;2009年
10 李平兰;长寿老人源双歧杆菌优良菌株的筛选及生理功能研究[D];中国农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邹芳勤;双歧杆菌抑制因素研究和动力学模型建立[D];江南大学;2004年
2 陈玉梅;双歧杆菌完整肽聚糖治疗食物过敏小鼠及对调节性T细胞影响的研究[D];重庆医科大学;2011年
3 赵学敏;化疗药物对血液肿瘤患儿肠道菌群影响及微生态调节剂干预作用的研究[D];河北医科大学;2011年
4 张莉滟;双歧杆菌与乳杆菌原生质体融合的初步研究[D];重庆医科大学;2002年
5 于静;用PCR法快速定量人类粪便中双歧杆菌的研究[D];大连医科大学;2004年
6 黎永学;双歧杆菌和酿酒酵母原生质体融合的研究[D];重庆医科大学;2002年
7 吴金光;两种硅酸盐细菌特异性PCR方法的建立及应用[D];浙江理工大学;2010年
8 包海泉;益生菌制剂对家畜免疫促进作用的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
9 徐广超;豆渣可溶性膳食纤维的制备及功能性的研究[D];江南大学;2005年
10 张磊;随机扩增多态性DNA技术鉴定双岐杆菌的研究[D];南京农业大学;2000年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;在这里 生命将会出现奇迹[N];科技日报;2000年
2 山东龙力生物科技股份有限公司;低聚木糖与微生态、双歧杆菌及人体健康[N];中国食品质量报;2003年
3 何德功;日本研究出用双歧杆菌治疗癌症的技术[N];中国中医药报;2003年
4 北京军区总医院营养科 魏文青;益生菌——肠道清道夫[N];中国医药报;2005年
5 严双红;保健从肠道开始[N];中国医药报;2006年
6 中华预防医学会微生态学分会副主任委员《中国微生态学杂志》副主编 杨景云 教授;龙拱双歧因子制剂——奉献给二十一世纪人类的健康[N];科技日报;2000年
7 谭医生;调节肠胃,从宝宝开始[N];医药经济报;2007年
8 山东龙力生物科技有限公司;双歧杆菌在肠道微生态中的地位[N];中国食品报;2009年
9 ;低聚果糖的发展历程[N];消费日报;2007年
10 比利时新鲁汶天主教大学 玛塞尔·罗伯弗劳德(Marcel Roberfroid) 陈晓林 马志民 译;益生元发展中尚待解决的问题[N];中国食品报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978