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IgY介导的检测隐孢子虫卵囊的间接免疫荧光方法的初步建立

邵兆霞  张龙现  宁长申  菅复春  李素萍  马超峰  仇书兴  周春香  
【摘要】:隐孢子虫病的诊断和卵囊的检测目前,隐孢子虫卵囊的检测方法主要有直接镜检、染色镜检、免疫学方法(如ELISA和IFAT)及PCR方法等。我们应用贝氏隐孢子虫卵囊制备特异性的卵黄抗体,以水稀释- 硫酸饺盐析法提纯IgY抗体,初步建立IgY介导的检测隐孢子虫卵囊的间接免疫荧光方法,IgY的最佳稀释工作浓度为1:4 000~1:8 000,以3%的BSA稀释多抗能减少非特异性染色,能检测到的卵囊阈值为180~ 360个/mL样品,并能识别除贝氏隐孢子虫(C.baileyi)外其他种的隐孢子虫卵囊。结果显示该检测方法具有隐孢子虫属特异性,且有良好的敏感性,由于IgY抗体具有诸多优于其它lgG抗体的优势特性,IgY抗体在隐孢子虫卵囊检测中的应用,将会为检测环境、水源中正在威胁人类健康的隐孢子虫卵囊的污染,探索了一条新途径。

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