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白色青年羊驼皮肤cDNA文库的构建及毛色相关基因的表达分析

范瑞文  董常生  张俊珍  赫晓燕  程志学  李鹏飞  白瑞  
【摘要】:从白色青年羊驼皮肤提取总RNA,并分离mRNA,利用SMART技术,构建了羊驼皮肤全长cDNA 文库。库容量达109,重组率达80%以上。同时通过T7和5’端特异引物对文库重组体进行了PCR鉴定,证明了该cDNA文库的高质量性,可达到研究的要求。之后,随机挑选了600个阳性噬斑进行测序,结果显示: 未知基因有62个,占10.3%;发现表达丰度相对较高的基因是皮肤结构蛋白基因;表达丰度次之的是皮肤信号分子;通过直接影响黑色素细胞而与毛色形成相关的毛色相关基因10个,占1.7%;可能与毛色相关的基因有信号分子,另外在黑色素细胞产生的上游路径发现3个可能与毛色基因相关的基因,占0.5%,它们是 vimentin;skin calmodulin-related factor(scrf);troponin。

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