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虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因在毕赤酵母中的表达

杨松涛  夏咸柱  乔军  王铁成  常爽  黄耕  
【摘要】:克隆了虎源猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因并首次在Pichia pastoris酵母中进行了分泌表达。用特异性引物从FPV中扩增出VP2基因,将其克隆到pGEM-T载体中,得到重组质粒pTVP2进行测序。将回收目的基因VF2片段定向克隆到pPICZaA中,构建出重组质粒,pPICZaAVP2,线性化后电转化毕赤酵母细胞GS115,PCR法筛选阳性重组酵母,并用1%甲醇诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明,重组酵母菌培养物上清中检测到相对分子量约为32 kD的重组蛋白,Western-blotting证实该重组蛋白可以与FPV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明重组VP2蛋白具有正确的空间构象,可望作为猫科动物FPV感染诊断和免疫预防用抗原。

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