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犬细小病毒核酸疫苗及其实验免疫研究

邱薇  范泉水  李作生  杨美峰  郑颖  李丽红  王双印  李江  夏咸柱  
【摘要】:以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VPI基因,PCR产物经纯化和Not I/BamH I双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空质粒及生理盐水,8 w接种一次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制效价,第二次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第三次接种4w后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7 d及14 d时采血,测定血清的血凝抑制效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。本研究证明了所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。

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