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表达传染性支气管炎病毒S1基因重组禽痘病毒的构建

田占成  孙永科  王云峰  智海东  刘胜旺  王玫  童光志  
【摘要】:将鸡传染性支气管炎病毒S1基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681-IBVS1。将pSY681-IBVS1转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达鸡IBV Sl蛋白的重组鸡痘病毒rFPV-IBVS1。在含有x-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选且进一步纯化14代。S1基因的PCR检测表明,获得的含传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒能够稳定遗传,间接免疫荧光和Western-blot等试验证实该重组病毒在CEF内真实地表达了分子量约为90 ku的具有免疫学活性的IBVS1糖蛋白。

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