收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

FMDV VP1基因在大肠杆菌中的表达及应用研究

田明尧  金宁一  李昌  郑敏  秦晓冰  
【摘要】:将携带口蹄疫病毒VP1基因的原核表达质粒pETTrxVP1转化入表达菌BL21(DE3),经IPTG诱导,成功实现VP1基因的高效表达。表达的蛋白主要以包涵体形式存在,表达量超过沉淀总蛋白量的20%。采用多步洗涤、切胶纯化等方法对表达的蛋白进行了初步纯化,纯化率达85.4%,产量为4mg/L。同时采用改良过碘酸法制备了HRP酶标记兔抗牛IgG,确定其工作浓度为1:800。最后,利用纯化的重组蛋白和酶标二抗,建立了检测牛体内口蹄疫病毒抗体的间接ELISA检测方法,并用于口蹄疫基因工程疫苗效果的评价。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 谭昕;肖旭倩;言普;沈文涛;王亚;周鹏;;A、O型口蹄疫T/B细胞多抗原表位融合基因植物表达载体的构建[J];生物技术通报;2011年08期
2 张丽;石玮;张雷;李杰;李娜;安鹏丽;张悦;王蓓;孟明;王家鑫;;负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD4~+T细胞应答[J];中国兽医科学;2011年07期
3 朱咏梅;朱来华;郑小龙;王宫璞;王琰;;口蹄疫非结构蛋白研究进展[J];中国动物检疫;2011年05期
4 信爱国;苗海生;;口蹄疫病毒致病性及抗原变异研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2011年04期
5 杨双;马军武;周广青;林密;冯霞;刘涛;代鹏;;核糖体展示口蹄疫单链抗体库的构建[J];中国生物工程杂志;2011年07期
6 赵蕾;管宇;李坤林;于新友;沈志强;;伪狂犬病病毒分子生物学的研究进展[J];中国兽医科学;2011年07期
7 邵军军;王景锋;常惠芸;柳纪省;;口蹄疫病毒3D蛋白对表位多肽免疫效果调节作用的研究[J];畜牧兽医学报;2011年09期
8 Linda Hüsser;于琳琳;;慢病毒介导的RNA干扰鉴定RIG-Ⅰ、MDA-5和TLR3在猪上皮细胞识别RNA病毒中的作用[J];中国畜牧兽医;2011年08期
9 赵清;孙普;刘在新;李平花;包慧芳;曹轶梅;白兴文;付元芳;卢曾军;李冬;;一种新型T细胞免疫原的原核表达及对口蹄疫疫苗的免疫增强作用[J];生物工程学报;2011年09期
10 向智龙;卓建华;程振涛;欧德渊;鲜思美;尹传宝;黄璐;禾彩红;;贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建[J];中国畜牧兽医;2011年07期
11 王文华;秦宏阳;曹宗喜;于俊勇;吴欣伟;于淼;孔维力;刘志刚;张桂红;;猪繁殖与呼吸综合征病毒广州株的分离鉴定与全基因序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2011年11期
12 刘文倩;王猛;张奕强;刘永生;张杰;;C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性[J];江苏农业科学;2011年04期
13 程振涛;岳筠;周碧君;许乐仁;王开功;文明;李永明;;羊痘病毒P32基因生物信息学分析[J];西北农业学报;2011年08期
14 张立霞;于在江;周剑芳;舒跃龙;;流感病毒样颗粒疫苗研究进展[J];病毒学报;2011年04期
15 丁农;张金卫;李江涛;鱼南洋;邹国平;冯世民;徐森华;;利用家蚕BmNPV生物反应器规模化生产基因工程产品的关键技术研究[J];中国蚕业;2011年03期
16 宋桂强;刘玉洁;韩佃刚;信吉阁;邱薇;李作生;范泉水;;1株新发现的军犬细小病毒的病原分离及VP2基因序列分析[J];云南大学学报(自然科学版);2007年S3期
17 俞宁;张兆敏;岳华;;新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达[J];中国畜牧兽医;2011年08期
18 马丰英;邹浩勇;何启盖;;表达猪肺炎支原体免疫原性基因的重组猪霍乱沙门氏菌对小鼠的免疫原性[J];微生物学报;2011年09期
19 李秀梅;江丽萍;郭立力;李颖;朱雅宁;石瑜;杨爱华;陈荣荣;;鸡贫血病毒全长基因感染性分子克隆的构建[J];动物医学进展;2011年08期
20 崔莉;朱战波;朱洪伟;崔玉东;朴范泽;;金黄色葡萄球菌isdB基因克隆、表达及其抗原性鉴定[J];河北科技师范学院学报;2011年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 田明尧;金宁一;李昌;郑敏;秦晓冰;;FMDV VP1基因在大肠杆菌中的表达及应用研究[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
2 杨鑫;王红宁;周英顺;高荣;曾博;徐昌文;丁梦蝶;;猪源O型口蹄疫病毒分离株VP1基因特征分析[A];四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集[C];2011年
3 邬苏晓;刘镇明;罗满林;戚一达;;口蹄疫病毒3ABC基因的原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
4 邱杨;肖性龙;刘建丽;李惠芳;张经纬;余以刚;吴晖;;口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
5 潘群兴;王永山;何孔旺;欧阳伟;王晓丽;诸玉梅;夏兴霞;;重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
6 李夏莹;王建昌;郑世军;;口蹄疫病毒VP1,2C蛋白与宿主细胞相互作用机制的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒RNA组成、功能及分子致病机制的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
8 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;金宁一;;口蹄疫病毒3AB基因在重组杆状病毒中的表达及检测[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
9 杜以军;姜平;杨晓玮;汤景元;李玉峰;李永东;;猪口蹄疫病毒多抗原表位重组腺病毒的构建与鉴定[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
10 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒分子流行病学的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 洪琦;口蹄疫—伪狂犬病二价与口蹄疫—猪细小—伪狂犬病三价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2005年
2 易建中;抗A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒重组双价多肽疫苗研究[D];复旦大学;2005年
3 冉波;O型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白疫苗的功能研究[D];吉林大学;2006年
4 苏春霞;口蹄疫基因工程疫苗重组策略的探讨[D];南京农业大学;2007年
5 李勇;口蹄疫病毒3C(D)蛋白与宿主细胞因子Fascin-1相互作用研究[D];武汉大学;2010年
6 马鸣潇;FMDV分子背景分析、病毒拯救及多价基因工程疫苗研究[D];吉林大学;2007年
7 马海利;O型FMDV复合表位/CTB重组枯草芽孢杆菌构建与实验免疫[D];吉林大学;2008年
8 王芳;表达FMDV vp1基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究[D];中国农业科学院;2007年
9 陈关平;O型口蹄疫与伪狂犬病二价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2008年
10 海岗;表达FMDV vp1基因和山羊γ-干扰素基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究[D];中国农业科学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李任峰;检测口蹄疫病毒单抗ELISA方法的建立及口蹄疫病毒多抗原基因的融合表达[D];华中农业大学;2005年
2 金香兰;O型口蹄疫病毒VP1蛋白的比较与牛O型表位肽基因工程疫苗的研制[D];吉林大学;2007年
3 裴志花;牛O型口蹄疫病毒内蒙古疫苗株p1基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2005年
4 王若;口蹄疫病毒结构蛋白VP4基因的真核表达[D];河北农业大学;2010年
5 张先锋;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC、3AB、3A的克隆表达及3A蛋白间接ELISA方法的初步建立[D];新疆农业大学;2010年
6 金华利;口蹄疫病毒vp1体外表达和DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2004年
7 孙琳;MUC1肿瘤抗原和口蹄疫病毒抗体检测方法的建立[D];吉林大学;2004年
8 王钢;口蹄疫病毒VP1基因的序列分析及巢式PCR检测研究[D];四川农业大学;2005年
9 田飞鹏;杆状病毒介导O型口蹄疫病毒P12A和3C基因在Sf9细胞和BHK细胞中的共表达[D];西北农林科技大学;2010年
10 杜宇;猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测[D];山西农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;我国科学家研制成功口蹄疫基因工程疫苗[N];中国高新技术产业导报;2006年
2 ;禽畜“医保”听令基因工程疫苗[N];天津日报;2006年
3 通讯员 罗倩 记者 王春;我科学家研制成功口蹄疫基因工程疫苗[N];科技日报;2006年
4 见习记者 孔颖超;康宝基因工程疫苗项目开工[N];长治日报;2011年
5 记者 张咏晴;畜牧业杀手遇克星[N];文汇报;2001年
6 记者 陈卫东;上海内蒙古联合实施基因工程疫苗产业化[N];科技日报;2000年
7 吴星;口蹄疫对农产品市场的影响[N];期货日报;2005年
8 廖学时;构建感染性口蹄疫病毒粒子成功[N];医药导报(中药报);2004年
9 河北省畜牧兽医站 韩庆安(高级兽医师);春防牲畜口蹄疫[N];河北科技报;2006年
10 高飞;新型基因工程重组粘膜免疫口蹄疫疫苗获2006年度海淀园创新资金支持[N];科技日报;2006年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978