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嗜酸乳杆菌16s rRNA PCR检测方法的建立

颜世敢  朱丽萍  常维山  陆承平  
【摘要】:根据嗜酸乳杆菌16s rRNA保守区的基因序列,自行设计合成1对特异性扩增509bp目的片段的引物,上游引物为5’CAT AGC CGA GTT GAG AGA TG 3’,下游引物为5’ATC TAA TCC TGTTCG CTA CCC A 3’。通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测嗜酸乳杆菌的PCR方法。植物乳杆菌、保加利亚。乳杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均为阴性;嗜酸乳杆菌参考株则可扩增出509bp的特异性条带。扩增产物序列分析表明扩增片段的序列与GENEBANK发表的参考菌的核苷酸序列符合率为99%。用建立的PCR方法对分离的嗜酸乳杆菌进行检测,同样获得与嗜酸乳杆菌参考株一致的目的条带。实验结果表明,建立的PCR方法能够特异的检测嗜酸乳杆菌。

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