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猪圆环病毒2型ORF2基因在大肠杆菌中的表达

王忠田  杨汉春  
【摘要】:根据已经克隆的pGEMT-ORF2基因的序列,设计一对引物,进行质粒PCR,扩增ORF2’基因大小为598 bp的基因片段,克隆到表达载体pET32a中,经XhoI和BamHI酶切鉴定,得到阳性重组表达载体质粒pET-ORE2’,将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,经终浓度为2mM的IPTG诱导,高效表达了ORF2’基因编码的结构蛋白。表达量为20%。截止目前为止,这是国内首次在大肠杆菌中表达了该蛋白,经Western-Blot检测,表达的该衣壳蛋白能够识别PCV2阳性血清,这对猪圆环病毒感染和流行检测方法的建立奠定了良好的基础。

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