镉负荷诱导肝细胞胞内Ca~(2+)稳态失调的机制探讨
【摘要】:正通过观察离体培养的镉负荷肝细胞胞内游离Ca~(2+)及其培养液中Ca~(2+)含量和LDH活性变化,探讨镉诱导肝细胞胞内Ca~(2+)([Ca~(2+)]i)稳态失调的作用机制。方法选用原代培养肝细胞,按5×10~5/ml接种于24孔培养板中,常规培养24h贴壁生长稳定后,随机分成对照组(C组)、低剂量镉负荷组(L组)、中剂量镉负荷组(M组)、高剂量镉负荷组(H组),每组5孔。L、M、H组加入灭菌的CdC12溶液使其终浓度分别为0、5、10、25μmol/L,分别在实验后第3、6、9、12、24h收集细胞,以荧光探针Fluo-3/AM负载,运用LSCM观测肝细胞[Ca~(2+)]i荧光影像和像素;并测定实验后6、12h
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