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1,2,4和5型鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白多肽的组成及免疫原性研究

程安春  汪铭书  刘兆宇  周毅  陈孝跃  方鹏飞  郭宇飞  
【摘要】:本研究采用超声波裂解和超速离心法提取1、2、4和5型鸭疫里默氏杆菌(RA)的外膜蛋白,在电镜下四种血清型RA的外膜蛋白呈现典型的双层泡状结构,形态主要呈O型或牙齿状或不规则的小碎片。经过SDS-PAGE电泳分析结果表明:1型RA的外膜蛋白由11条多肽组成.分子量在25KD-143KD之间,主要蛋白多肽分子量为31KD,44KD.69KD。77KD,82KD.91KD和107KD,其相对百分含量分别为15.98%、10.21%、12.30%、10.38%、12.8%、10.96%;2型RA的外膜蛋白由11条多肽组成.分子量在26KD-135KD之间,主要蛋白多肽分子量为31KD,33KD.75KD.101KD和116KD。其相对百分含量分别为16.97%、15.14%、13.97%、19.83%、12.69%;4型RA的外膜蛋白由10条多肚组成.分子量在26KD-124KD之间.主要蛋白多肽分子量为32KD.38KD.80KD和114KD,其相对百分含量分别为21.37%、12.65%、11.04%、18.43%;5型RA的外膜蛋白由13条多肽组成.分子量在28KD-121KD之间,主要蛋白多肽分子量为31KD.43KD.70KD.89KD.92KD和111KD。其相对百分含量分别为10.09%、22.75%、9.96%、10.03%9.34%和15.94%。经过免疫印迹证实.1型RA的44KD、2型RA的40KD、4型RA的75KD和5型RA的39KD外膜蛋白分别与免疫鸭血清出现较强的阳性反应,是主要免疫原蛋白.用分离自1、2、4和5型RA的外膜蛋白加上弗氏佐剂制备的抗原免疫雏鸭后.可诱导产生较强的抗体,免疫鸭对同源RA菌株的攻击可产生100%的免疫保护。

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