收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

RT-PCR及RFLP分析技术对禽传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因鉴别的研究

磨美兰  李康然  韦平  
【摘要】:本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因(引物A)和S1糖蛋白基因N-端高变区Ⅰ(引物B)的两对引物对3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及5个地方分离株(C60,D41A,D41B,A1121,1171)进行RTPCR扩增。用引物A时,有5个IBV毒株扩增到目的片段(1720bp),地方分离株中有三个却扩增不到;用引物B时,所有8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物(228bp)。对1720bp的PCR产物用限制性内切酶Hae Ⅲ进行酶切,结果得出三个不同的RFLP图谱,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱,Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱;对228bp的PCR产物进行Dde Ⅰ、Rsa Ⅰ限制性内切酶消化,根据它们的RFLP图谱,8个IBV毒株可分为五个基因型;综合两对引物的PCR产物的RFLP分析结果,8个IBV毒株可分为七个基因型,分型的结果与传统的血清学方法基本吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点,为现场流行毒株的定型(基因型/血清型)及其S1基因变异的研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘巍;孔义波;张兴晓;柴同杰;;鸡传染性支气管炎病毒0801株的分离鉴定及S1基因序列分析[J];动物医学进展;2011年08期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 磨美兰;李康然;韦平;;RT-PCR及RFLP分析技术对禽传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因鉴别的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
2 王红宁;魏甬;周生;柳萍;;禽传染性支气管炎病毒中国四川株S1基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
3 余祖华;王红宁;丁轲;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册)[C];2008年
4 余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;唐梦君;胡慧琼;李晓英;廖娟;张毅;;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)[C];2005年
5 王红宁;周生;胡慧琼;黄勇;李春;杨帆;柳萍;;禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达质粒的构建[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
6 刘兴友;李文刚;唐桂芬;戴亚斌;刘尚高;甘孟侯;;用pFASTBAC-THa系统表达IBV SD株S1基因的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
7 谢芝勋;廖敏;庞耀珊;谢志勤;邓显文;刘加波;李康然;;禽呼肠孤病毒S1基因扩增克隆与鉴定[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
8 曾瑜虹;王红宁;李玉玲;阳泰;汪雪;张鹏举;;携带禽传染性支气管炎病毒N基因减毒沙门菌活载体疫苗的构建[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
9 李春;王红宁;周生;代敏;杨帆;;禽传染性支气管炎病毒S_1基因玉米表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
10 周继勇;;传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971毒株)结构蛋白和S1基因的结构分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 程丽琴;传染性支气管炎病毒S基因马铃薯生物反应器的建立[D];浙江大学;2003年
2 周生;禽传染性支气管炎病毒分离株的全基因组及S1、M、N基因DNA疫苗研究[D];四川农业大学;2007年
3 戴亚斌;鸡传染性支气管炎病毒JS/95/03和SD/97/01株S1糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性评价[D];南京农业大学;2001年
4 田浪;禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合DNA疫苗构建及免疫研究[D];四川农业大学;2009年
5 蒋贻海;传染性支气管炎致腺胃病变毒株变异的分子基础及我国和东南亚分离株的分子流行病学研究[D];南京农业大学;2002年
6 王晶钰;鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西分离株N、M和S1基因的分子遗传变异研究[D];西北农林科技大学;2006年
7 刘澜澜;腺胃型IBV的分离鉴定及三种不同致病型IBV毒株组织嗜性的比较[D];东北农业大学;2010年
8 潘杰彦;传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)全结构蛋白基因的克隆和序列分析[D];南京农业大学;2001年
9 谭琳;芪合酶基因转化番茄产生白藜芦醇的研究[D];华南热带农业大学;2002年
10 贺秀媛;鸡传染性支气管炎病毒LX4株主要结构基因的研究[D];西北农林科技大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余祖华;禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中表达的研究[D];四川农业大学;2005年
2 魏勇;禽传染性支气管炎病毒S1基因RT-PCR、RT-套式PCR扩增及其序列分析[D];四川农业大学;2001年
3 鲜凌瑾;禽传染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究[D];四川农业大学;2007年
4 李春;禽传染性支气管炎病毒M基因的克隆、序列分析及S_1基因玉米表达载体的构建[D];四川农业大学;2003年
5 田占成;表达传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护效力的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
6 王文成;鸡嗜肾型传染性支气管炎病毒W株的分离、致弱及其S1基因序列的测定[D];中国人民解放军军需大学;2002年
7 吴建祥;传染性支气管炎病毒S1基因在马铃薯中的表达[D];浙江大学;2002年
8 李斌;禽呼肠孤病毒感染流行病学调查与广西地方分离株S1基因的测序和克隆[D];广西大学;2004年
9 聂磊;鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03的鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价[D];东北农业大学;2007年
10 周生;禽传染性支气管炎病毒N基因RT-PCR、克隆及序列分析[D];四川农业大学;2002年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 黎彬;肺癌发生机制寻踪[N];中国医药报;2004年
2 江南雪舞;像皇冠一样的冠状病毒[N];大众卫生报;2005年
3 苏国威 编译;解析SARS病毒 科学抗击“非典”[N];中国医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978