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T-DNA介导的promoter trap系统

陈石燕  王宗阳  
【摘要】:正 随着水稻基因组测序的完成,功能基因组的研究已受到研究人员的关注。我们选用随机插入一个报告基因,通过检测报告基因的表达模式来鉴定分离基因,即用promoter trap系统来分离鉴别具有时空专一性表达特征的水稻启动子及其基因,进而研究该基因启动子的作用特点。为此,我们构建了两个质粒p13GUS和p13GUs2。质粒p13GUS是将一个无启动子的GUS基因编码区插入T-DNA,并使GUS基因的5’端紧靠T-DNA的右边界,3’端位于T-DNA中部。当此质粒经农杆菌介导转化水稻后,整合到水稻染色体上某一基因启动子下游、并临近转录位点且方向一致时,GUS基因就能在该水稻基因的启动子指导下表达。质粒p13GUS2是在质粒p13GUS的基础上,在GUS报告基因前插入了一段内含子的剪接受体位点

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