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一种新型稻瘟菌蛋白激发子的克隆与功能研究

陈铭佳  曾洪梅  邱德文  
【摘要】:稻瘟病是世界各国稻米产区最严重的病害之一,严重影响水稻的产量。在病原菌与寄主植物互作中,病原菌可以分泌一些与植物相互作用的蛋白质。本文报道了一种从稻瘟菌中筛选出的、能引起烟草叶片过敏反应的新型蛋白。通过稻瘟菌培养、胞外蛋白沉淀、离子交换柱纯化、切胶回收等手段分离纯化到一种蛋白,该蛋白能引起烟草的过敏反应。进一步用双向电泳分离该蛋白,仍为单一蛋白,将其命名为MoHrip1(Magnaportheoryzea hypersensitive response inducing protein 1)。挖取蛋白斑点,通过质谱测序得到三条肽段序列,在稻瘟菌基因组库中比对匹配上一种假设蛋白。根据假设蛋白保守序列设计引物,克隆得到该蛋白的编码基因,全长为429bp。推测其编码的蛋白质含有142个氨基酸,分子量为14.32kDa,等电点为4.53。在大肠杆菌中表达MoHrip1,表达蛋白同样可以引起烟草叶片的过敏反应。实验结果表明,MoHrip1具有激发子的典型特征,可以引起氧暴发、活性氧物质的积累、细胞外质的碱化和NO的积累等早期防御事件,同时,也能刺激烟草细胞中的一些次生代谢物的产生,如胼胝质、酚类物质和木质素等,提高烟草植株的系统抗病性。进一步的研究正在进行中。

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