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ANTI-8098A标记前后异质性及抑菌活性比较

张彦  车建美  刘波  
【摘要】:青枯病生防菌ANFI-8098A,经德国菌种保存中心(DSMZ)鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus,strain ANTI-8098A),由福建省农业科学院生物农药研究中心自番茄植株根际土壤分离获得,对青枯雷尔氏菌具有较强的抑菌作用。以ANTI-8098A为出发菌株,采用质粒pCM20通过电击转化法对其进行gfp标记,标记菌株编号为ANTI-8098A:pCM20。比较了ANTI-8098A标记后的菌株与原始菌株的异质性。通过对ANTI-8098A以及gfp标记菌株ANTI-8098A:pCM20培养过程中OD值的变化,绘制出生长曲线。ANTI-8098A在培养后的3h进入对数生长期,10h进入稳定生长期,29h OD值有所下降,直到60h仍保持一定水平;ANTI-8098A:pCM20在培养后的5h进入对数生长期,10h进入稳定生长期,直到60h一直保持缓慢稳定增长。相对ANTI-8098A而言,ANTI-8098A:pCM20在培养初期需要5h左右的适应期,从20h以后到60h内一直保持缓慢稳定增长,甚至超过了ANTI-8098A。通过pH值实验探究不同pH值对ANTI-8098A以及gfp标记菌株ANTI-8098A:pCM20的影响,ANTI-8098A在pH值6.4~8.0条件下都可以生长,对pH值变化比较敏感,最适pH值为7.5;ANTI-8098A:pCM20的最适pH值为7.0,但与7.5和8.0条件下相差不大,在pH值6.4时生长缓慢,比ANTI-8098A敏感,初步研究表明,ANTI-8098A和AN-TI-8098A:pCM20比较适于偏碱性环境下生长。通过生长曲线的绘制和pH值实验,可以看出转gfp对ANTI-8098A菌株的整体生物学特性影响不大,只是在生长初期需要一个适应期。参照葛慈斌在不同浓度ANTI发酵液对青枯菌强、弱菌株的影响中采用的方法进行ANTI-8098A及其gfp标记菌株ANTI-8098A:pCM20的培养以及其对3株不同寄主青枯菌强菌株的抑制试验。ANTI-8098A和ANTI-8098A:pCM20对不同青枯菌有不同的抑制作用,但两者相差不大,对于青枯菌77,ANTI-8098A:pCM20的抑菌率反而更高,ANTI-8098A的抑制率是94%,ANTI-8098A:pCM20的抑制率是100%;而对于青枯菌91,ANTI-8098A:pCM20的抑制率稍有下降,ANTI-8098A的抑制率是100%,ANTI-8098A:pCM20的抑制率是91.2%;ANTI-8098A对青枯菌459的抑制率是100%,ANTI-8098A:pCM20对青枯菌459的抑制率是100%。

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