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中国被毛孢甲醇提取物对LPS致大鼠肺泡巨噬细胞炎性反应的抑制活性和机制

冯慧琴  张颖茁  宋利芳  杨明俊  曾平  马博赢  杨庆尧  杨晓彤  
【摘要】:冬虫夏草(Cordyceps sinensis)能补益肺气,具有润肺、止咳、化痰和抗炎作用。本研究用LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383细胞炎性反应为模型,对冬虫夏草的无性型——中国被毛孢(Ophiocordyceps sinensis)菌丝体甲醇提取物(OSME)的抗炎活性和机制进行了探讨。MTT检测结果发现,无论是单独OSME(400μg/mL,24hr)或与1μg/mL LPS共同孵育均不显示细胞毒性和生长抑制作用。用Griess法分析培养液中的一氧化氮(NO)水平发现OSME(25-200μg/mL,24hr)无诱导NO活性,但对LPS强烈诱导NO的作用则有拮抗活性,能浓度依赖性地降低NO水平,在200μg/mL时可减少69%的NO生成量(p0.05)。免疫印迹分析显示,50,100和200μg/mL OSME可下调LPS诱导的NO合成酶(iNOS)和PGE-2合成限速酶(COX-2)高表达,相比LPS组,表达水平分别下调了59.2%、74.9%和75.7%(iNOS,p0.05),和28.6%、42.0%和47.9%(COX-2,p0.05)。进一步分析显示,OSME可拮抗LPS诱导的细胞p38和iKB磷酸化,下调pp38和p-iKB水平,并阻滞LPS诱导的NF-kB的核转位。结论:中国被毛孢冬虫夏草菌丝体甲醇提取物对LPS致大鼠肺泡巨噬细胞的炎症反应有抑制活性,其抑制机制可能与调控MAPK和NF-kB通路有关。

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