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进境加拿大豌豆上真菌病害的分离鉴定及系统发育研究

王颖  程颖慧  章桂明  汪莹  
【摘要】:本文通过挑取进境的加拿大豌豆中的罹病种子,用流水充分冲洗,分别用70%酒精浸泡1分钟、1.3%的次氯酸钠处理2分钟进行表面灭菌,无菌水冲洗3次,将罹病组织置于含有青霉素和链霉素的PDA培养基上,25℃12小时光照12小时黑暗培养,纯化得到102个菌株。对所分离的菌株进行培养性状及形态学观察同时进行基因序列分析,通过核糖体DNA内转录间隔区(ITS区)、肌动蛋白基因(Actin)、β微管蛋白基因(β-tubulin gene)、钙调节蛋白基因(calmodulin gene)、翻译延长因子(EFNI-1α)、大亚基片断(LSUrDNA)、小亚基片断(SSUrDNA)的扩增和测序,并针对这些基因进行了系统发育研宄。结果表明加拿大豌豆上分离的真菌共有10个种属,其中对豌豆危害严重的是壳二孢综合症病菌,主要包括豌豆脚腐病菌(Phoma pinodella)、豌豆壳二孢菌(Ascochyta pisi)、豌豆萎蔫病菌(Ascochyta pinodes)。豌豆是世界上第二大食用豆类作物,可分为粮用豌豆、食用嫩豆粒、豆苗和嫩荚(荷兰豆)的菜用豌豆。我国是第二大豌豆生产国,随着人民生活水平的提高,对营养丰富的豌豆产品的需求量也不断增长,加之养殖业的发展,对豌豆的需求量已远远超过生产量。进境豌豆中携带大量病残体,而不少病菌可通过种子和病残体远距离传播,口岸卸货、运输过程的撒漏以及加工厂的筛下物如管理不当均可造成病菌进入农田而定殖,传入可能性较大,它们一旦传入中国,将对中国的豌豆生产造成严重影响。

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