收藏本站
收藏 | 论文排版

双氢青蒿素结合高强度间歇运动对高脂饮食诱导糖脂代谢紊乱C57BL/6J小鼠的改善作用及机制研究

高照  杨杏萍  张援  徐勤  
【摘要】:研究目的:青蒿味苦、性寒,属寒凉药物,为菊科植物黄蒿的干燥地上叶茎部分,具有清热解暑、除蒸、截疟功能。青蒿素是由我国科研人员从菊科植物黄花蒿叶中提取并进行结构鉴定和功能验证的具有过氧键的新型倍半萜内酯结构的天然抗疟药物,具有高效、低抗药性和低毒的特点。最新研究结果表明青蒿素类化合物还具有抗肿瘤、调节免疫反应以及糖尿病等代谢性疾病的潜在用途,而高强度间歇运动也被证实对于减少脂肪积累具有作用。本研究拟对青蒿素类药物的体内活性形式双氢青蒿素(DHA)灌胃结合高强度间歇运动对于高脂诱导的糖脂代谢紊乱小鼠的改善作用及其机理进行研究。研究方法:选取6周龄C57BL/6J雄性小鼠50只,通过Research Diets 60%Fat高脂饲料喂养造模共12周,随机在造模组中处死5只。取血清进行总胆固醇及甘油三酯检测,并取肝脏进行病理切片检查HE染色法评定非酒精性脂肪肝程度,保证造模有效性。选取体重在35-38g之间糖脂代谢异常小鼠,随机分为高脂饲养诱导肥胖模型组(HFD)、高脂饮食+高强度间歇运动组(HFD+HIIT)、高脂饮食+高、低剂量给药组(HFD+DHA(16.5mg/kg、33mg/kg,给药剂量以人临床给药剂量根据体表面积比法换算))组,高脂饮食+高剂量给药+高强度间歇运动给药组(HFD+DHA+HIIT)组共5组(n=8),同时取同周龄正常饲料饲养(CW+溶媒5%CMC-Na,n=8)、正常饲料+灌胃给药小鼠(CW+DHA,33mg/kg,n=8)作为对照。第19周开始各给药组每天早上称重后灌胃给药(DHA避光振荡溶于5%CMC-Na),HFD+DHA+HIIT组同时进行一周5次,每次50分钟的HIIT运动(每次以12m/min速度训练5min+17m/min速度训练10min+22m/min速度训练10min的顺序进行2循环跑台训练)。干预6周后,各组分别禁食16小时和4小时后做GTT(葡萄糖耐受)、ITT(胰岛素耐受)功能实验,末次运动和给药24h后摘眼球取血分离血清,处死后取小鼠肝脏、棕色脂肪(BAT)、皮下白色脂肪(iWAT)、附睾白色脂肪(eWAT)。分析不同组间体重、肝重、肝重比、棕色脂肪(BAT)、皮下白色脂肪(i WAT)、附睾白色脂肪(eWAT)重量及与体重比,试剂盒测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),取部分肝组织做免疫荧光染色通过激光共聚焦显微镜观察肝组织免疫荧光染色样本核蛋白NF-κB(P65)肝细胞表达及转核情况,油红染色观察肝细胞脂滴;提取肝总蛋白,Westernblot检测小鼠肝组织FXR、TotalAMPK、p-AMPK(Thr72)、PGC-1α和SREBP-1c、β-action(内参),观察蛋白含量及AMPK磷酸化水平;取小鼠肝脏及不同位置脂肪组织,提取总RNA应用实时荧光定量Q-PCR检测肝脏代谢性核受体FXR及下游调控的孤儿核受体SHP及肝脏糖脂代谢相关基因PGC-1ɑ、G6Pase、PEPCK、SREBP-1c mRNA表达以及白色脂肪组织β-氧化分解及产热关键基因CPT1B、FABP3、ACADLm RNA表达;病理HE染色及油红O脂肪染色观察肝组织病理学损伤。图形分析采用GraphPad Prism7.0软件,数据差异性由Student T test方法分析,P0.05时,认为有统计学差异。研究结果:肝组织WesternBlot结果显示HFD+DHA33mg/kg、HFD+HIIT和HFD+DHA+HIIT组肝组织磷酸化AMPK和FXR蛋白表达水平升高,同时HFD+DHA+HIIT组其调控的下游靶基因PGC-1α和SREBP-1c表达水平较模型组同时明显降低。肝组织核受体FXR及其下游基因SHP、BSEP蛋白表达升高,Q-PCR实验显示FXR及其下游基因SHP、BSEP等m RNA表达在(HFD+DHA33mg/kg)及(HFD+DHA+HIIT)组显著上调,而(HFD+DHA+HIIT)组上调更明显(folds:3.08±0.86,2.08±0.37,3.08±0.37),同时肝脏糖脂代谢和肝脏胰岛素抵抗水平关键靶点PGC-1ɑ、G6Pase、PEPCK、SREBP-1c mRNA表达显著下调(folds:0.56±0.09,0.47±0.10,0.42±0.11和0.46±0.07);HFD+DHA+HIIT组外周皮下白色脂肪CPT1B、FABP3、ACADL m RNA表达显著上调(folds:1.45±0.19,1.39±0.21,1.17±0.13),体重(BW)显著降低(40.53±0.93VS 35.79±1.22),皮下白色脂肪体重比(iWAT/BW)(2.99±0.50 VS1.71±0.33)及附睾白色脂肪体重比(eWAT/BW)(4.09±0.49VS2.29±0.53与高脂模型组相比显著降低,而棕色脂肪体重比(BAT/BW)(0.24±0.02VS0.29±0.01)显著提高,糖代谢功能性葡萄糖耐受GTT、胰岛素耐受实验曲线下面积AUCs呈现显著差异(P0.05),血清中总甘油三酯TC、总胆固醇TG水平显著降低(6.31±0.31VS 5.34±0.25,1.44±0.06 VS 1.18±0.09),免疫荧光染色肝组织核蛋白NF-κB(P65)转核水平降低,空泡变性和肝脂肪变性明显改善。研究结论:与高脂模型组相比,双氢青蒿素灌胃结合高强度间歇运动高脂饲养组的体重增长明显降低,外周小鼠白色脂肪棕色化增加,促进脂肪氧化分解。运动结合DHA给药可以协同上调AMP活化蛋白激酶(AMPK)介导的FXR核受体依赖性调控SHP孤儿核受体等肝脏糖脂代谢相关基因表达,改善非酒精性脂肪肝及胰岛素抵抗。提示高强度间歇运动可以协同DHA在小鼠体内通过激活肝脏AMPK-FXR-SHP-SREBP-1c通路和增加外周白色脂肪棕色化及氧化分解产热来改善高脂饮食诱导的糖脂代谢紊乱。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前17条
1 赵红勤;;高强度间歇运动对女大学生抑郁情绪的作用研究[J];聊城大学学报(自然科学版);2017年01期
2 王连军;;短期高强度间歇运动训练对青年男性运动耐量的影响分析[J];当代体育科技;2012年36期
3 陈华伟;杨军英;汤静;;一次高强度间歇运动对青年男性外周血T淋巴细胞分布与免疫应答的调节[J];体育科学;2017年09期
4 张满文;放映员不宜随意调整拆卸十字车间歇运动装置[J];影视技术;2004年12期
5 张媛媛;李昊;;间歇运动对高血压大鼠血管舒张能力的影响研究[J];科技视界;2014年30期
6 秦立成;放映机间歇运动装置磨损检修的几种方法[J];影视技术;2002年12期
7 梁崎;焦睿;江沁;王于领;陈艺莉;伍贵富;刘鹏;丁建新;;短期高强度间歇运动训练对青年男性运动耐量的影响[J];中国康复医学杂志;2011年10期
8 李月芝;放映中间歇运动部卡死的原因及解决办法[J];影视技术;2004年06期
9 汪雅静;张超;李兵晖;姚丽萍;;间歇运动处方在2型糖尿病病人中的应用进展[J];护理研究;2018年20期
10 陶友石;松花江固定放映机十字车间歇运动装置[J];影视技术;1999年09期
11 陈峰杰;;对间歇运动中追及问题的研究[J];中小学数学(初中版);2008年Z1期
12 梁巧琴;刘亚南;田振军;;间歇运动降低炎症和蛋白泛素化降解改善心梗导致的大鼠骨骼肌萎缩[J];北京体育大学学报;2018年09期
13 华大年;;利用连杆曲线实现间歇运动的连杆机构 《机构选型基础》之六[J];机械制造;1982年06期
14 汪雅静;张超;吕少萍;李兵晖;姚民秀;闫会敏;吴莹玉;姚丽萍;;高强度间歇运动对2型糖尿病患者糖脂代谢指标影响的研究[J];中华护理杂志;2019年11期
15 李硕奇;王聪;张甜甜;王梦君;朱显贵;;不同间歇方式高强度间歇运动后能量及底物消耗的特点[J];中国组织工程研究;2019年23期
16 张媛媛;李昊;;间歇运动对高血压大鼠抗氧化能力的影响研究[J];科技视界;2014年29期
17 刘学敏,欧阳光耀,侯俊武;间歇运动不均匀槽轮机构的应用和设计[J];邵阳高等专科学校学报;2000年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 高照;杨杏萍;张援;徐勤;;双氢青蒿素结合高强度间歇运动对高脂饮食诱导糖脂代谢紊乱C57BL/6J小鼠的改善作用及机制研究[A];第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编[C];2019年
2 戴剑松;;高强度间歇运动与中低强度持续运动的能量代谢对比研究[A];第四届全民健身科学大会论文摘要集[C];2018年
3 李瑶;郭璐;;高强度间歇运动的情感效价与愉悦感研究述评[A];第二十一届全国心理学学术会议摘要集[C];2018年
4 薄海;杨爽;张勇;;高强度间歇运动训练对青年男性淋巴细胞线粒体含量的影响[A];2017年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“学生体质健康与运动生理学”学术研讨会论文集[C];2017年
5 梁巧琴;刘亚南;田振军;;炎症和蛋白质泛素化在间歇运动改善心梗致骨骼肌萎缩中的作用[A];2018年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“科技创新与运动生理学”学术研讨会论文集[C];2018年
6 史秀超;蔡梦昕;田振军;Shaojun Du;;间歇运动和骨髓干细胞动员对心梗大鼠心肌细胞增殖的流式细胞检测和免疫荧光观察[A];2015年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“运动与心血管保护”学术研讨会论文摘要汇编[C];2015年
7 宋伟;田振军;;间歇运动刺激心梗心肌血管新生相关miRNAs的表达[A];2015年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“运动与心血管保护”学术研讨会论文摘要汇编[C];2015年
8 林洪梅;龚然;芦荻;黄传金;张文茜;张禹;;高强度间歇运动对不同位置篮球运动员多目标追踪的影响[A];第十九届全国心理学学术会议摘要集[C];2016年
9 伏睿臻;田振军;;间歇运动通过激活心肌CTRP3-Akt通路促进心梗大鼠血管再生[A];2015第十届全国体育科学大会论文摘要汇编(一)[C];2015年
10 贾单单;田振军;;间歇运动通过上调心梗大鼠骨骼肌LIF及其受体抑制骨骼肌萎缩[A];2015第十届全国体育科学大会论文摘要汇编(一)[C];2015年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 彭峰林;间歇运动对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[D];华南师范大学;2007年
2 李娟;C57BL/6J小鼠白色脂肪与棕色脂肪组织蛋白质组学研究[D];北京协和医学院;2015年
3 马伏英;有氧运动和脂肪酸构成对糖脂代谢紊乱动物模型的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
4 刘浩;C57BL/6J双足直立小鼠脊柱侧凸模型中探究褪黑素对骨代谢异常作用机制及脊柱畸形相关影像学研究[D];南京医科大学;2017年
5 左加成;降糖消渴颗粒及益气温阳组分对肥胖小鼠C57BL/6J白色脂肪棕色化的影响研究[D];北京中医药大学;2017年
6 贺凯;黄连生物碱调节高脂C57BL/6J小鼠胆汁酸信号通路和肠道微生物改善血脂异常研究[D];西南大学;2017年
7 徐文慧;双氢青蒿素抗疟机制[D];中国中医科学院;2019年
8 邵颖颖;双氢青蒿素对脑胶质瘤细胞凋亡、迁移侵袭的作用及其机制[D];重庆医科大学;2018年
9 田喜凤;双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的损伤作用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
10 穆德广;双氢青蒿素抗肺癌作用及其机制研究[D];第四军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 代春燕;高强度间歇运动对不同肌纤维类型骨骼肌炎症因子影响[D];广州体育学院;2019年
2 张佳琦;间歇运动降低心梗大鼠心脏氧化应激调节Smyd1表达改善心功能[D];陕西师范大学;2017年
3 王磊;7~9岁儿童高强度间歇运动后短时恢复特征研究[D];西安体育学院;2017年
4 由璐;山楂超微粉对高脂膳食诱导的C57BL/6J小鼠肥胖的调控作用及素食营养餐粉研制[D];河北科技师范学院;2019年
5 隋苗苗;洋葱皮黄酮类化合物对C57BL/6J小鼠抗肥胖作用的研究[D];延边大学;2015年
6 孔晶;高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏胆汁酸调控通路基因表达的影响[D];遵义医学院;2018年
7 吕明惠;电针穴位对放射性脑损伤C57BL/6J小鼠海马神经元凋亡及突触可塑性影响及机制研究[D];河南中医药大学;2018年
8 薛芬;章光101生发系列产品对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响[D];西北农林科技大学;2009年
9 雷月月;王不留行黄酮苷改善肝脏糖脂代谢紊乱的作用及其机制研究[D];江南大学;2019年
10 赖颖;熊果酸改善老年大鼠糖脂代谢紊乱、线粒体障碍与自噬能力的研究[D];重庆医科大学;2019年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 方剑春;双氢青蒿素专利案何时尘埃落定[N];中国医药报;2008年
2 记者 胡德荣;双氢青蒿素增溶技术研究获突破[N];健康报;2013年
3 记者 胡德荣;双氢青蒿素抗肿瘤新机制被揭示[N];健康报;2012年
4 通讯员 齐琦 王甜 记者 张晔;布满微针的贴片或让坐着减肥成现实[N];科技日报;2017年
5 刘云;可抑制白色脂肪形成的基因被发现[N];中国食品报;2010年
6 记者 王心见;加发现引发老鼠发胖的基因[N];科技日报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978