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紫外诱导刺参自溶过程中细胞凋亡现象的研究

衣萌  李鹏飞  杨静峰  
【摘要】:刺参是一种营养及药用价值极高的海洋棘皮类水产食品。但是刺参具有极强的自溶能力,其分子机制至今仍然不清楚。新鲜刺参在紫外光下以0.056mW/cm~2的光强度下照射0.5小时引发自溶,于室温下静置6小时,采用TUNEL法研究刺参体壁细胞DNA片段化现象、以免疫组织切片技术Caspase-3进行免疫标记。同时检测了Caspase-9和Caspase-3的酶活变化情况。采用western blot技术对细胞色素C的迁移现象进行了研究。TUNEL实验结果表明,与新鲜刺参对照组相比,经过紫外诱导的刺参体壁细胞从0小时至6小时发生了显著的DNA片段化,在诱导后6小时时体壁中超过50%的细胞发生了DNA片段化,DNA片段化是细胞凋亡发生的标志性事件;紫外诱导后Caspase-3酶发生了极显著的升高,Caspase-3是细胞凋亡的效应分子,一旦被激活即发生不可逆性凋亡,也是细胞凋亡发生的标志性事件;采用western blot技术对细胞色素C的研究表明,线粒体外细胞质中的细胞色素C含量随自溶时间的延长发生了显著的升高。Caspase-9和Caspase-3的比活力也发生了显著升高,这表明,刺参细胞凋亡是通过线粒体凋亡途径实现的。

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