酶法制备南美白虾虾头蛋白ACE抑制肽的研究

【摘要】：以废弃南美白虾虾头为原料,采用酶法制备低分子降血压肽,并分析其肽结构。研究了Alcalase碱性蛋白酶、胰蛋白酶、肽酶R和中性蛋白酶四种不同蛋白酶对虾头蛋白的水解效果,从中选择最佳蛋白酶,并以正交试验确定了最佳蛋白酶酶解虾头蛋白的最佳反应条件。最适反应条件下得到的酶解产物经Sephadex G-15凝胶过过滤层析分离,所得ACE抑制率最大的峰物质进行液质联用分析其结构。依水解度和ACE抑制率大小,选定碱性蛋白酶为酶解虾头蛋白制备ACE抑制肽的最适酶,以ACE抑制率为指标,确定酶解最佳反应条件为:温度50℃、pH8.0、[E]/[S]=0.3%、酶解时间2h,所得酶解产物ACE抑制率为41.45%。酶解产物经Sephadex G-15凝胶过滤层析分离得五个峰,其中ACE抑制率最大的4号峰物质ACE抑制率为74%。对其进行液质联用分析,结果表明此ACE抑制肽分子结构为Asp-Pro,相对分子质量为230.1。此实验探寻了一种废弃虾头深加工的方法,通过生物技术提高了废弃虾头的附加值,若工业化生产还需进一步改进分离纯化方法。