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Modulation of voltage-sensitive Na~+ currents in differentiated SHSY5Y cells by BmKI

Hong-Yan ZHU  Pei XIAO  Yu-Xiao ZHAO  Nan JIANG  Yong-Hua JI  
【摘要】:Objective Activation of voltage-gated sodium channels(VGSCs) has been related to disorders of neuronal excitability such as epilepsy and pain.BmK I,a site-3-specific modulator of VGSCs from the Chinese scorpion Buthus martensi Karsch,has been confirmed to induce spontaneous nociception and hyperalgesia and generate epileptiform responses in rats.However,the exact mechanism of modulation of BmK I on VGSCs in never cells is still not yet clear.The present study is to explore the modulation of BmK I on sodium currents eliciting from differentiated SHSY5Y cells.Methods Immunofluorescence revealed that two VGSCs subtypes Navl.2,Navl.6 were expressed with highest abundance in SHSY5Y cells treated with retinoic acid for 6 days.Therefore,patch-clamp was performed in SHSY5Y cells treated with retinoic acid for 6 days to record the whole-cell currents.Results The inward currents eliciting from differentiated SHSY5Y cells were totally blocked by 100 nM TTX.The inactivation of I_(Na) was dramatically delayed in the presence of 500 nM BmK I in SHY5Y cells,and the persistent proportion of I_(Na) was obviously increased.BmK I at500 nM can shift the steady-activation curve toward hyperpolarization direction by 4.8 mV(n=24,P0.05),additionally,after a series of pulse stimuli the steady-inactivation curve shift toward hyperpolarization direction by 5.9mV.Furthermore,BmK I at 500 nM shift the fast inactivation curve toward hyperpolarization direction by 9.1mV(n=15,P0.05).Conclusion BmK I is an effective and novel molecule in the study of VGSCs-related neuronal hyper-excitability.

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