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Regulation of Notch target gene Hesl expression by TGF-α in human glioma cell line U251

【摘要】:正Ras and Notch signaling have recently been shown to cooperate in the maintenance of neoplatic transformation. To investigate the interaction between Notch and Ras/MAPK pathways and its potential mechanisms in human glioma cell line U251,we treated cells with DAPT(aγ-secretase inhibitor) to block Notch activity,TGF-a(a ERK agonist) to activate Ras signaling and PD98059(a specific inhibitor of MEK1/2) to reduce phosphoration of ERK separately or simultaneously. It was showed that DAPT inhibited U251 cell proliferation whereas TGF-αstimulated cell proliferation in a time- and dose-dependent manner.The expression of Notch pathway signaling molecules Notch 1,RBP-Jκand Hes1 was down-regulated in the level of mRNA and protein after 24 h DAPT exposure.TGF-αtransiently increased phosphoration level of ERK 1/2 and up-regulated the mRNA and protein expression of Hes1,which is a primary Notch target gene,but no change was observed on upstream components Notch 1 and RBP-Jk.PD98059 was added 2 h prior to treatment could inhibit ERK 1/2 phosphoration activated by TGF-α,but it did not affect the Notch 1,RBP-Jk and Hes1.Taken together,these results suggest that DAPT effectively blocked Notch signaling transduction and inhibited proliferation of U251 cells.TGF-αtransiently promoted ERK 1/2 phosphoration and stimulated U251 cells proliferation in a longer period.TGF-αinduced the Notch target gene Hes 1 expression was independent on both Notch and ERK activation.

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