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杂种松SRAP-PCR反应体系的优化

罗锐  杨会肖  黄少伟  赵奋成  刘天颐  刘纯鑫  
【摘要】:通过单因素试验,对杂种松SRAP反应体系的各主要影响因子Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度以及TaqDNA聚合酶的量进行了优化筛选,最终得出杂种松SRAP-PCR反应的最佳体系为:25ul体系中含有dNTP0.25mmol/L、Mg2+2.0mmol/L、Taq酶1.0U,引物0.4mmol/L,模板DNA30-50ng以及1%体积的DMSO。采用该优化体系,通过对两种杂种松(火加松、湿加松)基因组DNA进行SRAP扩增,结果表明,大部分的引物对扩增出来的带清晰可辨、背景较少,完全满足分子标记的要求,为杂种松SRAP标记的相关研究提供了基础。

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