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NO/PKG介导Ca~(2+)/钙调神经磷酸酶信号通路调控血管平滑肌细胞增殖的研究

李世军  孙宁玲  
【摘要】:目的:研究NO/PKG介导Ca2+/钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)信号通路对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控。方法与结果:植块法原代培养Wistar大鼠VSMCs。Western blot测定CaN表达,定磷法通过鉴定游离无机磷酸盐含量测定CaN活性。MTT法测定VSMCs的增殖,丫啶橙/溴化乙锭荧光染色法测定VSMCs的活性。结果显示SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPs使苯肾上腺素刺激诱发的VSMCs吸光度分别降低27.32%和36.57%,而Rp-8-pCPT-cGMPs则可使苯肾上腺素刺激诱发的VSMC吸光度增加79.02%。各组药物对于VSMCs活性的作用无显著差异。VSMCs应用维拉帕米预处理后,苯肾上腺素刺激诱发的VSMCs吸光度降低22.05%,并且上述吸光度可以被SNAP或Sp-8-pCPT-cGMPs进一步抑制,但可被Rp-8-pCPT-cGMPs轻微升高。VSMCs应用环胞素A预处理后,苯肾上腺素刺激诱发的VSMC吸光度降低36.67%,但是,上述吸光度不能被SNAP或Sp-8-pCPT-cGMPs进一步抑制或被Rp-8-pCPT-cGMPs升高。苯肾上腺素刺激诱发的CaN表达与活性可被SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPs抑制,但可被Rp-8-pCPT-cGMPs增强。结论:NO/PKG调节VSMCs内游离钙离子水平,进而影响CaN表达与活性,从而部分抑制VSMCs增殖而非活性。

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