【摘要】：目的:研究不同浓度三氧化二砷(Arsenic trioxide, As2O3)在体外对宫颈鳞癌Siha和宫颈腺癌Hela细胞株的生物学效应,初步探讨As2O3对宫颈癌细胞株增殖、凋亡的作用及其机制。方法:宫颈鳞癌Siha和宫颈腺癌Hela细胞株体外培养。应用不同浓度的As2O3作用于Siha和Hela细胞株。运用以下几种检测方法观察As2O3对两种宫颈癌细胞株增殖、凋亡的影响:①三磷酸腺苷生物素发光法(ATP—biolumines- cence Assay,ATP法)检测As2O3对细胞增殖的影响,并选择合适的实验剂量。②苏木素-伊红(hematxylin and eosin,HE)染色观察细胞的形态学变化③琼脂糖凝胶电泳检测细胞的DNA条带。④流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。⑤细胞免疫组化链霉素抗生物蛋白-过氧化酶联接法 (Streptavidin—peroxidase,SP)检测As2O3诱导宫颈癌细胞株凋亡过程中相关蛋白Fas和Fas配体(Fas ligand,FasL)的表达情况。结果:1．As2O3在2．5～10 μmol／L浓度范围内能够有效抑制Siha和Hela细胞株增殖(P0．05),并具有时间和剂量依赖性(P0．05)。两种宫颈癌细胞株对As2O3的敏感性无显著性差异(P0．05)。2．2.5 μmol／L和5 μmol／L 浓度的As2O3作用Siha和Hela细胞株48小时可以观察到细胞出现典型的凋亡变化。HE染色表现为细胞核固缩、染色质浓缩、凋亡小体形成等。琼脂糖凝胶电泳DNA片段观察到 DNA梯形条带。流式细胞仪分析细胞凋亡率显示,As2O3诱导Siha和Hela细胞株凋亡具有剂量和时间依赖性(P0．05), 相同浓度相同时间As2O3诱导Hela细胞株凋亡作用强于Siha 细胞株(P0．05)。3．2．5 μ mol／L和5μ mol／L浓度的As2O3 作用Siha和Hela细胞株48小时后,细胞免疫组化显示Fas 蛋白表达均明显上调(P0．05)。5 μmol／L浓度的As2O3诱导Hela细胞株凋亡过程同时伴FasL蛋白表达明显上调(P0． 05)。结论:1．As2O3在体外分别与宫颈鳞癌Siha和宫颈腺癌Hela细胞株共同培养,发现在一定浓度范围内As2O3能够有效抑制两种宫颈癌细胞株增殖,并具有时效和量效关系。宫颈鳞癌Siha和宫颈腺癌Hela细胞株对As2O3的敏感性无显著性差异。2．As2O3能够诱导宫颈鳞癌Siha和宫颈腺癌Hela 细胞株凋亡,且呈时间剂量依赖性。3．As2O3诱导宫颈鳞癌 Siha和宫颈腺癌Hela细胞株凋亡的机制可能与As2O3上调宫颈癌细胞Fas蛋白表达有关。较高浓度的As2O2还可能通过上调FasL蛋白表达参与宫颈腺癌Hela细胞株的凋亡。