收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

舌鳞癌耐药细胞系CyclinD1 RNA干扰的体外研究

周晓健  张志愿  张萍  潘红芽  陈万涛  叶冬霞  
【摘要】:目的:用人工合成的耐药相关基因CyclinD1SiRNA 干扰舌鳞癌耐顺铂细胞系,探讨靶基因转录调控的作用以及剂量和时间效应,为逆转耐药提供实验基础。方法:取转染试剂SiPORTTM NeoFXTM与化学合成的SiRNA转染Tca8113/ CDDP细胞,优化转染条件。用CY3荧光素酶标记SiRNA GAPDH,分别在转染后4h,24h,48h,72h于激光共聚焦显微镜下观察瞬时转染率。Trizol提取总RNA,调整RNA 浓度,反转录成cDNA,用SYBR Green荧光染料法,实时定量PCR技术分析目的基因mRNA的表达情况,同时采用蛋白印迹(Western blot)检测目的基因蛋白水平的表达。结果:经优化转染条件后,Tca8113/CDDP细胞中启动子带有荧光CY3的SiRNA GAPDH转染率达90%以上。在转染 CyclinD1 SiRNA后24h,48h,CyclinD1 mRNA表达的抑制率为80%,86%,72h最为明显,为92%。在观察了不同剂量的SiRNA CyclinD1的基因沉默效果后发现,在低于 100nM剂量浓度下,RNA干扰抑制与剂量大小有关,当剂量进一步加大时,抑制效应则维持在“平台期”,此外,转染 24h、48h和72h后,CyclinD1蛋白的表达也明显下降,细胞增殖减缓。结论:化学合成SiRNA CyclinD1在体外试验中,对Tca8113/CDDP细胞中靶基因的沉默作用呈现剂量和时间依赖效应。本实验的结果为进一步的研究提供一定的理论参考及依据。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 包仕廷;郭日昌;;细胞增殖周期调控因子P15与Cyclin D1在胆囊癌发生发展中的作用[J];广东医学院学报;2011年03期
2 周立涛;朱家斌;;套细胞淋巴瘤中P53基因的研究进展[J];中国实验血液学杂志;2011年03期
3 李小婷;殷辰俞;孟徐莲;段颉;孔秋月;冯晴;;褐藻糖胶抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年09期
4 刘岩;王芳;王蕾;时志民;;大肠癌eIF-4Ec、yclinD1表达及意义[J];现代中西医结合杂志;2011年27期
5 桑建中;田芳;娄卫华;金红军;袁林林;;人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达[J];郑州大学学报(医学版);2011年04期
6 庄静;刘丽娟;王明霞;韩娜娜;卜美玲;;肺积1号方对Lewis肺癌小鼠移植瘤细胞周期及CyclinD1表达的影响[J];齐鲁护理杂志;2011年17期
7 李尊岭;邵淑红;谢书阳;岳真;马颖;;CyclinD1反义核酸诱导肺腺癌细胞A549的凋亡[J];生理学报;2011年03期
8 林世永;徐国良;王菁;;结直肠腺瘤组织Axin2和Cyclin D1表达及其生物学意义的研究[J];中华肿瘤防治杂志;2011年14期
9 李留炀;吴国英;杨筱荣;汤根兄;杨静;;Stat3、Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年09期
10 何艳姣;乔超;刘朝霞;俞进;李光;;乳腺癌中-βcatenin、cyclinD1、c-myc表达及意义[J];首都医科大学学报;2011年04期
11 罗刚;董俊英;陈谦明;李秉琦;;CyclinD1 mRNA反义寡脱氧核苷酸导入对颊癌细胞株BcaCD885生物学行为的影响[J];广东牙病防治;2011年07期
12 刘文凤;王言奎;吕艳;;宫颈癌组织CyclinD1和P27表达及意义[J];齐鲁医学杂志;2011年05期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周晓健;张志愿;张萍;潘红芽;陈万涛;叶冬霞;;舌鳞癌耐药细胞系CyclinD1 RNA干扰的体外研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
2 王晓梅;鞠桂芝;马淑梅;付士波;;电离辐射对小鼠胸腺细胞pl6、CyclinD1、CDK4表达的影响[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全中国青年学术交流会论文摘要汇编[C];2001年
3 王海明;许延发;;Survivin、CyclinD1在大肠癌中的表达及其临床意义[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年
4 邢汝东;冯晓宇;李建华;李华;李金忠;韩正学;;口腔颌面部恶性肿瘤患者血清中SCCA、Cyfra21-1、EGFR、CyclinD1含量的检测[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
5 赵京霞;李萍;刘欣;盛巡;梁代英;;桂皮醛对NIH3T3细胞周期的影响[A];第八届全国中西医结合实验医学研讨会论文汇编[C];2006年
6 姚晖;张继平;邓虹珠;姜晓刚;梁颖;黄志恩;;哈蟆油对雌性衰老大鼠肝p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
7 吴红芳;符宝敏;陈肖鸣;王宗敏;;肾母细胞瘤中cyclinD1蛋白的表达[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
8 沈飞;李智涛;赵瑞红;吴逸明;吴卫东;;用ChIP技术分析A549细胞中AP-1与cyclinD1和caspase3基因转录启动子的结合[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
9 沈飞;李智涛;赵瑞红;吴逸明;吴卫东;;用ChIP技术分析A549细胞中AP-1与cyclinD1和caspase3基因转录启动子的结合[A];中国科学技术协会第十届年会21分会场论文汇编[C];2008年
10 姚晖;张继平;邓虹珠;姜晓刚;梁颖;黄志恩;;哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响[A];全国中医药防治老年病学术交流会学术论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 钟清玲;糖尿病大鼠表皮干细胞β-catenin和cyclinD1的表达及其在创面修复中的作用研究[D];南昌大学;2011年
2 李晓荣;c-Abl非受体酪氨酸激酶调节C/EBPβ转录活性的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 马建群;NF-kappa B和AP-1在非小细胞肺癌中的表达及其意义的研究[D];中国医科大学;2005年
4 黄海福;亚砷酸肝动脉灌注联合中药对中晚期肝癌干预的研究[D];广州中医药大学;2007年
5 王瑞;胰岛素对5-氟尿嘧啶化疗增效作用及其机制[D];郑州大学;2006年
6 马俊芳;CyclinD1对神经干细胞的增殖和分化作用的调节及其机制研究[D];华中科技大学;2010年
7 胡文献;转录因子KLF4抑制肺癌发生、发展的作用研究[D];浙江大学;2008年
8 杜芸;食管癌侵袭转移相关调控因子的研究及其意义[D];河北医科大学;2005年
9 陈丽君;Wnt信号通路参与心梗后心肌组织愈合过程的调控[D];复旦大学;2005年
10 张玥;乳腺癌细胞系MCF-7的SP亚群生物学特性研究[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 董美娥;丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用及对P16和CyclinD1表达的影响[D];山西医科大学;2011年
2 王岳松;PTEN、MAPK、CyclinD1在肺癌中的表达、预后及相关性[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
3 张爱芝;ERK活性对哮喘大鼠CyclinD1表达的影响及调控作用[D];山西医科大学;2010年
4 黄辉;p16、p27、cyclinD1、CDK4和Rb基因在胃癌演化系列组织中的表达及其意义[D];福建医科大学;2002年
5 史培荣;口腔鳞状细胞癌组织中STAT3和CyclinD1的表达及意义[D];山西医科大学;2010年
6 姜晗;P16、CyclinD1和CDK4在大肠癌组织中表达及意义[D];吉林大学;2011年
7 祝文峰;p16、cyclin D1在卵巢癌中的表达及相关性[D];中南大学;2003年
8 卢军峰;甲状腺乳头状癌BRAF~(V600E)基因突变与CyclinD1、P27、NIS、TPO蛋白的关系[D];广西医科大学;2011年
9 王玮;CyclinD1及Genistein对K562细胞周期调控及凋亡的实验研究[D];第四军医大学;2001年
10 陈董明;细胞周期调控因子CyclinD1、CDK4在肺腺癌、鳞癌中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 高国起;山东胃肠肿瘤研究获突破[N];中国医药报;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978