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IL-6上调NF-kB的表达促进卵巢癌细胞的增殖

高燕  杜涌瑞  王越  邱爽  王卓  王莉  牛文彦  杨洁  姚智  
【摘要】:目的探讨IL-6是否通过NF-kB途径促进卵巢癌细胞的增殖,为进一步研究IL-6介导肿瘤细胞增殖的信号转导机制提供实验数据。方法:应用卵巢癌细胞株OVCAR-3、Caov-3,采用MTT法,观察hrIL-6对其促增殖作用,同时设Anti—IL-6对照组。分别提取经IL-6和IL-6+抗IL-6抗体刺激的卵巢癌细胞株OVCAR-3和Caov-3之总mRNA,行RT-PCR检测其NF-kB亚单位p50和p65水平。应用ELISA法检测经上述处理的卵巢肿瘤细胞的NF-kB亚单位p50、p65蛋白水平。、结果:1.在hrIL-6终浓度为100ng/ml时,OVCAR-3、Caov-3增殖率分别为对照组的394%和381%。另一组实验,在加入hrIL-6的同时加入其相应抗体(anti-IL-6),共同培育96小时,经MTT检测,hrIL-6的促增殖作用几乎被完全抑制。无免疫活性的兔IgG单独与上述两种细胞株培育,对细胞的增殖均无影响。2.OVCAR-3细胞株hrIL-6组NF-kB亚单位p50、p65mRNA的表达量分别为1.17,1.25。hrIL-6+抗-6抗体组分别为0.79,0.77。Caov-3细胞株hrIL-6组NF-kB亚单位p50、p65mRNA的表达量分别为1.23,1.30。hrIL-6+抗-6抗体组分别为0.84,0.83。提示抗IL-6抗体几乎完全抑制了hrIL-6对细胞株NF-kB mRNA的活化。3.ELISA法检测发现,经hrIL-6刺激的两株卵巢肿瘤细胞NF—kB亚单位p50、p65与对照组相比在胞浆,胞核中的蛋白表达均有升高(P0.05),其中p65升高的幅度较大,这可能与其功能有关。经hrIL-6+抗-6抗体刺激两株细胞NF-kB亚单位p50、p65在细胞浆,细胞核中的表达量均较hrIL-6组下降,与其mRNA的表达情况相一致。结论:IL-6通过促进卵巢癌细胞表达NFkB,进而达到促进肿瘤细胞的增殖。

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