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microRNA-449在小鼠精子发生过程中的作用研究

徐晨  鲍坚强  李定  郭强苏  
【摘要】:精子发生包括精原细胞的自我更新、精母细胞的减数分裂以及精子形成3个连续过程。microRNA是多细胞生物内源性的一类长度约21~25个核苷酸的非编码RNA,不具有编码蛋白质的功能,通过基因转录水平或转录后水平调节靶基因mRNA的表达。microRNA-449是本实验室前期筛选到的、在小鼠睾丸组织优先高特异性表达的microRNA分子之一,位于cdc20b基因第2个内含子中。通过报告基因靶标验证、体外功能分析及microRNA-449敲除的纯合子小鼠研究表明:microRNA-449高特异性表达于精母细胞至延长形精子细胞,呈现与结构基因cdc20b协同一致的表达特点,并且其表达可能受睾丸组织特异性的转录因子CREM-tau和SOX5的表达调控;生物信息学分析揭示microRNA-449处于miRNA-gene网络的核心位置;我们采用最新的ET重组打靶技术成功构建microRNA-449 cluster被敲除的小鼠模型,表型分析显示部分microRNA-449敲除的纯合子小鼠精子发生异常,导致雄性不育。进一步深入研究microRNA-449在精子发生过程中的生物学作用有可能寻找到临床上诊治男性不育的靶标分子,具有重要的理论意义和临床应用价值。

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