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珍稀濒危植物珙桐脂肪酸脱饱和酶基因DiFad2克隆与表达

雷泞菲  彭书明  唐琳  徐莺  王胜华  陈放  
【摘要】:运用简并引物,通过RT-PCR及5′和3′RACE技术,成功得到珙桐?12脂肪酸脱饱和酶的cDNA(DiFad2)全长序列(EU275211)。该序列全长1389bp,包含一个1149bp的完整的开放阅读框(ORF),32bp5′-非翻译区片段和208bp3′-非翻译区片段。其ORF编码382个氨基酸的DiFad2蛋白,推测其分子量44.3kDa,等电点8.8。跨膜4次,定位于内质网。在酵母菌中成功表达,DiFAD2蛋白能利用18:1和16:1作为底物生成16:2和18:2,将油酸转变成亚油酸的?12脂肪酸脱饱和酶。

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