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一种重金属铜离子毒性的快速DNA检测法

常国华  潘纲  陈灏  
【摘要】:利用琼脂糖凝胶电泳法研究了铜离子对超螺旋φX174 RF DNA结构的影响。高浓度铜溶液(10-3mol/L-10-4 mol/L)与DNA作用24h后,可直接使DNA的超螺旋结构完全破坏;低浓度铜溶液(10-6mol/L)与DNA作用24h后,40%的超螺旋结构发生了转化,48h后58%的超螺旋结构被破坏。在作用时间一定的条件下,铜离子浓度越高,越容易开环断裂。在铜离子浓度一定的条件下,随着二者相互作用时间的延长,DNA超螺旋结构逐渐开环、断裂,直至完全消失。铜离子浓度、铜离子和DNA作用的时间与DNA各种结构百分含量之间具有一定的对应关系。本文尝试用概率单位法对超螺旋DNA的EC50值进行计算。4h-EC50(Supercoiled DNA),8h-EC50(Supercoiled DNA)和12h-EC50(Supercoiled DNA)值,分别为2.40×10-3mol/L,1.56×10-4mol/L和4.33×10-5mol/L。通过研究φX174 RF DNA在重金属离子作用下超螺旋结构的变化,有可能为快速、方便、灵敏地检测环境污染物毒性提供一种新的方法。

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