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蛋白核小球藻Rubisco活化酶基因的克隆与表达分析

邓意龙  孙雪  徐年军  杨锐  
【摘要】:Rubisco是光合碳同化的关键酶,Rubisco活化酶(RCA)则起调节Rubisco活性的作用。本文以单细胞绿藻蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)为实验材料,克隆了其rca基因序列并研究了光照周期、不同盐度和水杨酸浓度对rca和Rubisco小亚基(rbcS)基因表达的影响。应用RACE方法获得了1703bp的rca基因序列,其中包括66bp的5′非翻译区、1242bp的开放阅读框和395bp的3′非翻译区。同源性比对结果表明该蛋白核小球藻rca基因与绿藻和高等植物具有很高的同源性(最高达85%);密码子偏好性分析表明该基因偏好使用以G/C/T结尾的密码子;该RCA蛋白推测的等电点和分子量分别为8.44和45.71kD。荧光定量PCR结果表明随光照时间增加rca与rbcS转录表达逐渐降低;不同盐度胁迫下rbcS的mRNA量变化不大,而rca在37.5‰盐度下表达量为25‰盐度的2.69倍;1.0-3.0mmol/L水杨酸处理rca与rbcS表达均降低。本研究结果表明小球藻rca基因表达受以上3种环境因素的调控。

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