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荧光标记PCR全自动测序技术的研究

姜先华  沈红缨  于蛟  刘锋  
【摘要】:本文采用荧光染料标记 PCR 扩增测序方法,应用377型全自动测序仪,对人类 mtDNA 具有高度多态性 D 环区16091~16418之间328bp 碱基序列进行了测定。建立了稳定的荧光标记、自动分析碱基序列测定方法。对130例中国汉族人 mtDNA 进行序列分析,共检出83个可变碱基位点, 其多态性发生频率在0.769%~63.846%之间,TDP 值为0.99886。与同位素标记 PCR 方法人工 PAGE 分离进行测序得到的序列结果相比较,二者无显著性差异;并将获得的序列数据应用 MDIA 软件进行管理及进行样品之间偶合机率的计算。为将该项技术应用于刑事案件犯罪物证的鉴定打下基础。

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