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旋毛虫Ts87抗原基因在毕赤酵母中的构建及表达

王少华  诸欣平  顾圆  杨雅平  杨静  
【摘要】:正 目的利用甲醇营养型酵母—毕赤酵母表达系统表达旋毛虫Ts87抗原基因,以期获得具有高纯度的活性蛋白,为旋毛虫疫苗的研制奠定基础。材料与方法旋毛虫Ts87是本室利用免疫筛选的方法从旋毛虫成虫cDNA文库中筛选得到的一个尚未见报道的旋毛虫新基因。该基因由1172bp组成,DNAstar分析表明:Ts87编码的蛋白质由347个氨基酸组成,存在一定的抗原表位,含自己的分泌信号序列,理论分子量约38KDa。P~(PICZ)αA(购自Invitrogen公司)是一个既能在酵母中表达也能在大肠杆菌中表达的穿梭型整合载体,该载体具有一个α因子分泌信号肽序列,能够表达分泌型蛋白。根据表达载体P~(PICZ)αA的酶切位点和Ts87两端序列,设计了特异性引物一对,通过PCR扩增在Ts87两端

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