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玉米中伏马菌素B_1残留的ELISA检测方法研究

蒋文晓  盛雅洁  王战辉  沈建忠  
【摘要】:【目的】伏马菌素是一组由串珠镰刀菌产生的真菌毒素,主要污染玉米、小麦等谷物粮食。伏马菌素B_1(FB_1)是污染玉米等粮食中数量最多、毒性最强的伏马菌素。FB_1毒性较大,能引起马脑白质软化和猪肺水肿,并且与人类食道癌发病率有密切关系。因此,准确、快速的检测粮食中FB_1污染对于保障粮食安全和人民身体健康的具有重要意义。【方法】在本研究中采用戊二醛法将FB_1与BSA、OVA偶联和采用EDC活化酯法将FB_1与KLH偶联合成免疫原与包被原,并对其进行偶联效果鉴定。二种不同的免疫原分别免疫BALB/C小鼠,按照既定免疫程序免疫制备单克隆抗体。试验中制备的单克隆抗体经过抗体效价和抑制水平的测定,筛选合适建立ELISA的抗体。在ELISA方法建立过程中,抗体和包被原的最适工作浓度采用棋盘法测定,并从准确性、灵敏度、特异性和精密度等对新建ELISA方法进行评价。【结果】本实验建立了检测玉米中FB_1污染的间接竞争ELISA方法。该ELISA方法的检测限为5.4μg/kg,满足最大残留限量检测要求;50%抑制浓度(IC_(50))为2.2 ng/mL,对FB_2的交叉反应率为154%。在玉米粉样品以100μg/kg、200μg/kg和500μg/kg3个浓度做添加时回收率在78±11%~107±4%,变异系数在3%~15%之间。该ELISA方法与LC-MS/MS方法在同时分析6份自然感染的玉米样品具有很高的相关性,相关系数R~2为0.82。【结论】本研究建立的ELISA方法满足玉米中FB_1残留快速检测的需求。

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2 曲新勇;牦牛传染性鼻气管炎ELISA诊断方法的研究[J];中国兽医科技;1988年03期
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18 温和心;刘禄;;实验猴结核病检出率的探讨[J];广西畜牧兽医;2008年05期
19 牛春华;刘文森;高宏伟;邢丽杰;;封闭液对ELISA检测蓖麻毒素的影响[J];吉林农业科学;2008年05期
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1 邢春莲;徐阳阳;赵蕊;杨一;崔立莉;曹健荣;;血筛产品(ELISA)检测能力的评价[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
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1 李岩松;玉米中伏马菌素免疫学快速筛检方法研究[D];吉林大学;2011年
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1 康敏;玉米中伏马菌素B_1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫学快速筛选方法研究[D];南昌大学;2012年
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7 赵刚;狂犬病病毒P蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[D];湖南农业大学;2010年
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1 本报记者 何源;走近法国软件产业[N];电脑报;2003年
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4 上海市艾滋病监测中心供稿;迎战“艾魔”二十载回眸[N];文汇报;2000年
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9 中国农业大学食品学院教授 南庆贤;我国肉品业存在问题亟待解决[N];中国畜牧水产报;2001年
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