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米非司酮对斑马鱼卵巢组织中激素相关基因表达的影响

施嘉琛  邵兵  
【摘要】:【目的】抗性激素药物是一类人工合成的激素拮抗药物,被广泛应用于激素依赖型疾病(如乳腺癌、前列腺癌等)的治疗,由于其潜在的内分泌干扰效应,这类药物也引起了环境学家的关注。米非司酮是抗性激素中典型的抗孕激素,是孕激素受体水平的拮抗药,虽然已有研究在某些环境中检出了这类药物,但对其潜的生态毒理效应的研究还是空白。本研究以雌性斑马鱼为目标,初步探讨了米非司酮对成年斑马鱼卵巢中激素相关基因表达量的影响。【方法】本研究采用半静态暴露法,将刚产完卵的雌性成鱼暴露于不同浓度的米非司酮(溶剂对照组、1μg/L、10μg/L和100μg/L)中,暴露时间为雌鱼的一次产卵周期(7天),暴露后将斑马鱼麻醉并解剖取出卵巢组织。使用QuagenRNeasy Mini Kit试剂盒提取卵巢组织的总RNA,并将RNA反转录后采用实时荧光定量PCR的方法检测卵巢组织中典型雌激素受体基因(ERa、ERb)、雄激素受体基因AR、孕激素受体基因PR和卵黄蛋白原基因(vtg1、vtg2)的表达变化。【结果】如下图所示,在雌性斑马鱼一次产卵周期内,卵巢组织中vtg1、vtg2、ERa、ERb、和PR表达量与米非司酮暴露浓度之间存在明显的剂量效应关系。10μg/L的米非司酮暴露组中vtg1、ERa、ERb和PR的表达量与溶剂对照组相比发生明显上调,100μg/L米非司酮暴露组中vtg2和PR的表达量与溶剂对照组相比也发生明显上调。本研究未发现米非司酮对雌鱼雄激素受体AR的表达量产生影响。【结论】本研究通过米非司酮对雌鱼一次产卵周期暴露后相关激素基因的表达变化,初步探讨了该类物质潜在的生态毒理学效应。研究表明米非司酮可以显著引起雌鱼卵巢组织中vtg1、vtg2、ERa、ERb等基因表达变化,可以认为米非司酮对鱼类具有类雌激素效应。孕激素受体基因PR表达量的改变则预示着米非司酮可能对繁殖期雌鱼正常的孕卵过程产生影响。因此环境中抗性激素潜在的生态毒理效应引起相关研究者的关注。

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