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荧光定量PCR研究四溴双酚A对赤子爱胜蚓基因表达的影响

薛银刚  王晓蓉  孙成  蔡焕兴  徐东炯  
【摘要】:本文主要采用荧光定量PCR法,采用了最常用的DNA结合染料SYBR Green,以β-Actin为内参基因,在mRNA表达水平上研究新型有机污染物TBBPA对赤子爱胜蚓体内SOD、CAT、HSP70、p53基因的表达情况。通过实验条件经过优化,TBBPA处理组的所有目的基因均没有产生非特异性产物,具有较好的特异性。SOD和CAT基因的相对表达量随着TBBPA暴露浓度的升高而先升后降,整体上都处于上升趋势,说明SOD和CAT基因对TBBPA胁迫较为敏感,TBBPA对基因的损伤处于早期,所有浓度组的基因都得到了激发,清除机体所产生的活性氧自由基。p53基因表达与对照组相比,呈显著下降趋势。HSP70基因的表达量与对照组相比整体上是升高的,说明HSP70对TBBPA的胁迫也较为敏感,是机体内清除自由基的又一道重要防线。SOD,CAT,HSP70,p53基因在mRNA表达水平上均较为敏感,以上四个基因在TBBPA暴露浓度为0.05mg·kg~(-1)时表达有显著性差异,可考虑作为TBBPA胁迫下的蚯蚓分子生物标志物。

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