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双元表达短dsRNAs的转化细胞/家蚕对BmNPV的抗性研究

张鹏杰  薛仁宇  曹广力  贡成良  
【摘要】:为了利用RNAi技术提高家蚕对核型多角体病毒(BmNPV)的抗性,构建了带有BmNPVie-1、lef-1dsRNA双表达盒的转基因载体piggyantiIE-lef1-Neo。结果显示:表达双元dsRNA的稳定转化Bm细胞,对BmNPV的增殖表现出明显的抑制作用,特别是在接种病毒后的72-120h。通过反向PCR分析外源DNA片段插入基因组位点,结果显示:在转化细胞中,外源DNA可通过随机整合或按照piggyBac特定的转座位点TTAA插入细胞基因组。为了获得实用性抗BmNPV家蚕,我们通过精子介导的方法获得了转基因R6家蚕,经过继代筛选转基因家蚕已进入G3代,相关后续工作仍在进行。

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