收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用家蚕BmNPV多角体晶体固定外源蛋白质的研究

曹翠平  何芳青  郭爱芹  相兴伟  陈琳  吴小锋  
【摘要】:家蚕核型多角体病毒在感染晚期大量表达产生多角体蛋白,并形成结构致密的超大分子蛋白质晶体,其作用是有效保护内部包埋的病毒粒子,保证子代病毒的传播得以延续。本研究借鉴多角体包埋病毒粒子的原理,观察多角体是否也能够将外源蛋白质固定入多角体内部。利用能形成多角体的BmNPVPolh+Bac-to-Bac表达系统分别构建了含有EGFP和LacZ基因的重组病毒,该重组病毒在表达形成多角体的同时分别表达EGFP和LacZ蛋白。结果表明,共聚焦分析表达EGFP的病毒感染后形成的多角体能够发射绿色荧光。利用SDS-PAGE也证实了多角体中包涵有EGFP蛋白或LacZ蛋白。进一步发现细胞中单独表达的EGFP在室温放置6h就检测不到荧光信号,而多角体中的EGFP放置一个月后仍能检测到绿色荧光。这一现象说明,将多角体与外源基因同时表达,多角体中会包埋外源蛋白,且能较长时间保存外源蛋白的生物活性。这一现象对于解决蛋白质长期保存提供了一条新的途径,对于开发含有毒素蛋白的新型生物杀虫剂也有很好的参考意义。但对于外源蛋白进入细胞核并包埋进多角体的机理还有待更深入的研究。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 葛慈斌,曹阳,钟仰进,肖巧学,黄自然,林广云,龙綮新;化学诱变的BmNPV对家蚕细胞和虫体感染性的初步研究[J];蚕业科学;2000年01期
2 刘丽华,王利群,李兵,沈卫德,王文兵;柞蚕多角体病毒的纯化和鉴定[J];应用与环境生物学报;2005年01期
3 福原敏彦 ,绿川真理 ,伊藤广 ,夏耀;从蚕粪中提取纯净的CPV的方法[J];北方蚕业;1982年04期
4 蒋猷龙;;科学小品[J];蚕桑通报;1959年04期
5 黄可威,陆有华;泥土中家蚕中肠型脓病病毒多角体的检测技术研究[J];蚕业科学;1984年02期
6 古田要二;魏成贵;陆有华;;用福尔马林处理的家蚕多角体的溶解性和病原性的变化[J];中国蚕业;1983年01期
7 贡成良,卢铿明;家蚕核型多角体病毒四角形多角体的研究[J];蚕业科学;1993年01期
8 曹阳,徐兴耀,黄自然,钟仰进,谭佩婵;由家蚕蛹─BmNPV系统建立环境诱变剂检测分析模型的初步研究[J];蚕业科学;1997年04期
9 王坤荣;家蚕空头性软化病与胃肠型脓病的混合感染[J];蚕业科学;1963年02期
10 费建明;吴岩;占鹏飞;施国方;王文兵;;利用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ[J];蚕桑通报;2011年02期
11 卢蕴良;黄自然;卢鏗明;;“白口仔”蠶病的病原及其传染規律[J];广东蚕业;1964年04期
12 邹凤莲,钟伯雄;家蚕质型多角体病毒基因组的研究现状[J];中国蚕业;2000年04期
13 赵天福;日本留学见闻[J];蚕学通讯;1998年02期
14 彭建新;家蚕核型多角体病毒的离体增殖[J];蚕业科学;1992年04期
15 杨瑞丽,金勇丰,吴玉澄,张耀洲,吴祥甫;利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2001年02期
16 李广泽,尤锡镇,毕庶春,张兴达;柞蚕脓病多角体的裂解观察和毒力测定[J];蚕业科学;1980年03期
17 李兵,季平,卫正国,陈玉华,沈卫德;野蚕体内分离的NPV和BmNPV对家蚕和野蚕的交叉感染性研究[J];中国蚕业;2003年04期
18 有贺久雄 ,沈昌平;新编养蚕学大要——(续)第6章 蚕病[J];广西蚕业;1986年01期
19 李兵,沈卫德;从野桑蚕体内分离的NPV与BmNPV、AcMNPV间的RAPD分析[J];江苏农业科学;2003年06期
20 卓兵,王茜龄,朱勇;催青温度对家蚕抗核型多角体病毒(BmNPV)影响的研究[J];蚕学通讯;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曹翠平;何芳青;郭爱芹;相兴伟;陈琳;吴小锋;;利用家蚕BmNPV多角体晶体固定外源蛋白质的研究[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
2 潘敏慧;吕军;鲁成;;BmNPV的双基因干涉对病毒增殖的影响[A];中国蚕学会第八届暨国家蚕桑产业技术体系家(柞)蚕遗传育种及良种繁育学术研讨会论文集[C];2011年
3 李文学;青学刚;刘俊凤;刘刚;肖金树;徐安英;;家蚕品种871C×872C对BmNPV抗性鉴定研究[A];全国家蚕病害控制技术与安全养蚕模式学术研讨会论文集[C];2010年
4 崔颖俊;吴立娜;赵巧玲;裘智勇;沈兴家;唐顺明;郭锡杰;;家蚕幼虫感染BmNPV后血淋巴蛋白质组学分析[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
5 叶秋霞;鲁银松;薛仁宇;曹广力;贡成良;;表达短Lef-1 dsRNA的转基因家蚕抑制BmNPV增殖研究[A];全国家蚕病害控制技术与安全养蚕模式学术研讨会论文集[C];2010年
6 朱莎;王文兵;李兵;沈卫德;;家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因gp41及Da26的融合表达[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
7 贡成良;;转基因RNAi提高家蚕对BmNPV抗性研究[A];全国家蚕病害控制技术与安全养蚕模式学术研讨会论文集[C];2010年
8 张鹏杰;薛仁宇;曹广力;贡成良;;双元表达短dsRNAs的转化细胞/家蚕对BmNPV的抗性研究[A];全国家蚕病害控制技术与安全养蚕模式学术研讨会论文集[C];2010年
9 张晓丽;彭景琨;马焕艳;潘中华;郑小坚;曹广力;薛仁宇;贡成良;;家蚕JAK/STAT信号通路相关基因及对BmNPV感染应答初探[A];中国蚕学会商品性小蚕饲养规程和蚕病防控学术研讨会论文集[C];2010年
10 吴福泉;杨琼;肖阳;陈列辉;刘新涛;邢东旭;罗国庆;唐翠明;王振江;;累代添食BmNPV的选拔效果初报[A];华东·华中地区第十二次蚕种学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋亮;基于转基因工程的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)抗性素材创新及抗性机制研究[D];西南大学;2013年
2 周阳;家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bm5的基因分析及利用基因芯片筛选抗BmNPV相关基因[D];江苏大学;2010年
3 薛仁宇;表达dsRNA的转基因家蚕对BmNPV的抗性研究[D];苏州大学;2009年
4 相兴伟;家蚕BmNPV ODV-E56/BmP95的生物学功能及多角体包埋外源蛋白的研究[D];浙江大学;2013年
5 Bhaskar Roy(若伊);几种动物抗原在家蚕体内表达及shRNA体内外表达提高家蚕对核型多角体病毒抗性的研究[D];浙江大学;2012年
6 唐顺明;家蚕、野桑蚕LSP与HSC70-4基因启动子功能特性分析[D];中国农业科学院;2004年
7 沈兴家;BmNPV和AcMNPV egt 基因启动子特性及家蚕海藻糖酶基因启动子活性的滞育激素调节研究[D];中国农业科学院;2004年
8 赵巧玲;家蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂b1编码基因Ict-H启动子特性分析[D];浙江大学;2007年
9 黄璐琳;病原微生物黑胸败血芽孢杆菌(Bacillus bombyseptieus)等诱导家蚕(Bombyx mori)全基因组寄主应答研究[D];西南大学;2010年
10 张敏娟;家蚕核型多角体病毒ORF71和ORF54的功能研究[D];浙江大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李娜;抗BmNPV诱导型启动子转基因干涉载体的构建[D];西南大学;2010年
2 王婷婷;两株对BmNPV侵染差异的家蚕细胞系的全基因组表达谱分析[D];西南大学;2012年
3 匡秀秀;家蚕核型多角体病毒BmNPV39k启动子的分析与改造[D];西南大学;2013年
4 谢洪霞;家蚕柘叶饲养易感染核型多角体病毒(BmNPV)机制的初步研究[D];西南大学;2010年
5 田甜;转基因干涉BmNPV病毒的gp64与lef-1基因片段对病毒体外增殖的影响[D];西南大学;2010年
6 周敬波;家蚕核型多角体病毒泰国株的鉴定及其bro基因家族分析[D];安徽农业大学;2012年
7 李兵;野桑蚕体内分离的NPV和BmNPV的比较研究[D];苏州大学;2003年
8 张轶岭;BmCPV与BmNPV多角体对异源蛋白的包埋特性研究[D];苏州大学;2011年
9 徐颖;dsRNA对家蚕核多角体病(BmNPV)复制的抑制作用的研究[D];浙江大学;2004年
10 管蕊;利用酵母双杂交系统筛选与BmNPVPE38和VLF-1相互作用的蛋白[D];江苏科技大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978