K562细胞诱导NK细胞凋亡的实验研究

【摘要】：目的:探讨NK细胞系(NKL、NK-92细胞)与人红白血病细胞K562不同比例混合培养不同时间后NK细胞的凋亡及可能机制。方法:将K562细胞与NK细胞系(NKL、NK-92细胞)以不同细胞比例置于96孔培养板混合培养不同时间,用细胞流式术CFSE和CD56-FITC标记NK细胞,Annex-V-PE/7-AAD双染法检测NK细胞的凋亡百分比。同时在接种密度为1×105个/ml的NK-92细胞单独培养体系中加入不同浓度的Fas激活型抗体,24h后用流式细胞术检测NK-92细胞的凋亡率。结果:1)NKL细胞与K562细胞以10:1、5:1、1:1、1:2.5、1:5五种细胞比例混合培养24h、48h后,CFSE标记的NKL细胞的总体凋亡尤其是早期凋亡率,随细胞比例的降低呈升高趋势,而K562细胞的总体凋亡比例则缓慢下降趋势。48h组与24h组相比较,NKL的总体凋亡率有明显升高趋势,而K562的总体凋亡率的下降趋势更明显。2)NK-92细胞与K562细胞以5:1共同孵育3h后,CD56+NK-92细胞的早晚期凋亡率无明显改变。而以1:1,1:5,1:10混合培养24h后与对照组比较,CD56+NK-92细胞的凋亡率在1:1时也无明显改变,但1:5和1:10时均明显高于对照组,1:10组高于1:5组。3)随着加入Fas激活型抗体浓度的升高(0,2.5,5,10,20ug/mL),NK-92单独培养24h后凋亡率有上升趋势,分别为11%,14%,17%,17%,32%。结论:人红白血病细胞K562能诱导NK细胞凋亡,NK细胞的凋亡率与两种细胞比例和培养时间有相关性。NK的凋亡可能与其表面的Fas受体激活有关。