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黄芪注射液对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元caspase-3表达的影响

闫凤霞  高维娟  钱涛  叶冬青  张雅丽  侯志平  
【摘要】:目的:观察黄芪注射液对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因caspase-3表达的影响。方法:取原代培养8d的大鼠海马神经元,随机分为4组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪注射液溶剂对照组和黄芪注射液组。除正常对照组外均进行缺氧缺糖0.5h再复氧复糖。各组于复氧复糖后0h、0.5h、2h、6h、24h、48h、72h和120h采用免疫组织化学染色法和Western blotting检测caspase-3蛋白的表达,采用原位杂交检测海马神经元caspase-3 mRNA的表达。结果:免疫组化结果显示:与正常对照组相比,除0h和0.5h之外,缺氧缺糖/复氧复糖组各时间点海马caspase-3阳性神经元数目、占神经元总数的百分率及平均光密度值均明显增多(P0.05),于24h达到高峰。黄芪注射液溶剂对照组以上指标的变化趋势与缺氧缺糖/复氧复糖组相一致。黄芪注射液组除0h和0.5h之外,各时间点以上指标均比缺氧缺糖/复氧复糖组显著减少(P0.05)。Western blotting检测结果显示:除0h和0.5h外,各时间点缺氧缺糖/复氧复糖组海马神经元caspase-3蛋白的平均灰度值均较正常对照组明显增加(P0.05),24h最高;与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液溶剂对照组各时间点caspase-3蛋白的平均灰度值无明显变化(P0.05),而黄芪注射液组除0h和0.5h外,在各个时间点caspase-3蛋白的平均灰度值明显降低(P0.05)。原位杂交检测结果显示:caspase-3mRNA阳性神经元形态、数目、占神经元总数的百分率及平均光密度值的变化趋势与caspase-3蛋白的变化趋势完全一致。结论:黄芪注射液可抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因caspase-3的表达,从而抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元的凋亡。

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